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動物轉染試劑推薦

來源: 發(fā)布時間:2023-04-30

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LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),,并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合,。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率,。動物轉染試劑推薦轉染后6h觀察細胞狀態(tài),,并更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞,,用PBS洗滌3次以上,,以備RNA抽提。

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簡介:X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系,。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,,室溫穩(wěn)定,。2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率,。3.使用細胞毒性低的試劑,,結果相關性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞,。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網絡).在經過***次傳代培養(yǎng)之后,,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。上海陽離子聚合物轉染試劑對照

研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA,、mimic,、inhibitor,、mRNA和shRNA等RNA的轉染試劑,。動物轉染試劑推薦

對CHO細胞轉染效率的比較右圖:使用以上轉染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產商的提供的轉染步驟分別轉染到CHO細胞,。在轉染24小時后,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學發(fā)光監(jiān)測器測定,;GFP陽性細胞率使用BD公司的FACS檢測,。左圖:LipoD293試劑(升級版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價格比較(美元/1000微升)。所有的價格是從生產制造商的網站上收集對CHO細胞轉染效率的比較右圖:使用以上轉染試劑將編碼熒動物轉染試劑推薦

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