對(duì) HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較

右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細(xì)胞（在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）,。在轉(zhuǎn)染 48 小時(shí)之后,，用流式細(xì)胞儀檢測(cè) GFP 陽(yáng)性細(xì)胞（%）和熒光強(qiáng)度,。

左圖：血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑（升級(jí)版）對(duì)在 HepG2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞（生長(zhǎng)在膠原處理的培養(yǎng)皿上）---無血清和***，10% 血清和***的存在,，轉(zhuǎn)染 5 小時(shí)后換液和不換液,。

MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.北京磷酸鈣轉(zhuǎn)染試劑chufang

簡(jiǎn)介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系,。優(yōu)勢(shì)：1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑，無動(dòng)物源性成分,，室溫穩(wěn)定,。2.高轉(zhuǎn)染效率,，對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率,。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,，結(jié)果相關(guān)性好,。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能,。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENEHP,，導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))...湖北磷酸鈣轉(zhuǎn)染試劑chufang從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。

美國(guó)Polysciences公司是一家成立于1961年,，致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品,，單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng),，所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)（顯微技術(shù)）、生物技術(shù),、電子技術(shù),、護(hù)理及制藥工程等多個(gè)領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案,，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域,。隨后，開拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品,，使組織除了石蠟包埋外,，還能夠包埋在塑料塊中；開發(fā)染料和染色劑,，以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測(cè)方式,。與****合作，開發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球,。與美國(guó)國(guó)家**中心合作,，開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn),。繼而開發(fā)出超順磁珠,，用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究,。

X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,，溶于80%乙醇中,，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中,，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋,，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。3.對(duì)于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中,，前后移動(dòng)培養(yǎng)皿，混合均勻,；

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似,。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行,，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來說,，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便,，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 細(xì)胞轉(zhuǎn)染必備——高效低毒轉(zhuǎn)染試劑.湖北polyplus轉(zhuǎn)染試劑

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胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??！當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好，沒有細(xì)微污染,，鋪板均勻,。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！

載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng),、四質(zhì)粒系統(tǒng),，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng),！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失,，或污染別的質(zhì)粒,、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP 載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作,，要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,，質(zhì)粒間比例得當(dāng)，并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. 北京磷酸鈣轉(zhuǎn)染試劑chufang

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