上海儒安生物科技有限公司CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(簡(jiǎn)稱CCK-8)試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazandye),。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。用途:***篩選,、細(xì)胞增殖測(cè)定,、細(xì)胞毒性測(cè)定、**藥敏試驗(yàn)CCK8的優(yōu)點(diǎn):使用方便,,省去了洗滌細(xì)胞,,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;CCK-8法能快速檢測(cè),;CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度;CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法,;CCK-8法對(duì)細(xì)胞毒性?。籆CK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中為1瓶溶液,,毋需預(yù)制,,即開即用。CCK8的缺點(diǎn):與MTT法相比,,CCK8和XTT的價(jià)格比較貴,。CCK8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加,。與以往的增殖/毒性測(cè)定試劑相比較:檢測(cè)方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢產(chǎn)物的水溶性差。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品公司,?重慶tnk細(xì)胞增殖毒性測(cè)定試劑盒
細(xì)胞分裂有關(guān)的細(xì)胞器及作用:線粒體提供能量,。核糖體合成染色體復(fù)制所需要的酶及蛋白質(zhì),。中心體在某些低等植物或動(dòng)物細(xì)胞中,,參與形成紡錘體,以牽引染色體移動(dòng),。高爾基體合成纖維素和果膠,,參與細(xì)胞壁的形成。
②動(dòng)植物細(xì)胞有絲分裂的區(qū)別:前期紡錘體形成不同:植物細(xì)胞從兩極發(fā)出紡錘絲形成(低等植物由中心粒形成),。動(dòng)物細(xì)胞兩組中心粒發(fā)出星射線形成,。末期細(xì)胞分裂方式不同:植物的細(xì)胞板從**向四周擴(kuò)展,在高爾基體的參與下形成細(xì)胞壁,,將一個(gè)細(xì)胞分裂成兩個(gè)細(xì)胞,。動(dòng)物的細(xì)胞膜從中部向內(nèi)凹陷,將一個(gè)細(xì)胞縊裂成兩個(gè)細(xì)胞,。
3.典例:(2006年江蘇卷)菠菜根的分生區(qū)細(xì)胞不斷分裂使根向遠(yuǎn)處生長(zhǎng),,在分裂過程中不會(huì)出現(xiàn)的是( )
A.細(xì)胞分裂間期,,中心體的兩個(gè)中心粒各自產(chǎn)生一個(gè)新的中心粒
B.細(xì)胞分裂中期,染色體形態(tài)比較固定,、數(shù)目較清晰
C.細(xì)胞分裂前期,,核膜和核仁逐漸消失
D.細(xì)胞分裂末期,高爾基體參與細(xì)胞壁的形成 南京血管平滑肌細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)較新的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,。
上海儒安生物科技有限公司FBS 南美特級(jí)胎牛血清
產(chǎn)品介紹:
本品采自南美源健康母牛的出生前胎牛,,經(jīng)無菌采集、批量混合,,**終經(jīng)過3次0.1um過濾分裝而成,。本品適合于細(xì)胞株的保藏及培養(yǎng)、單抗研制,、絕大多數(shù)**細(xì)胞,。
特點(diǎn):
·適合細(xì)胞株的保藏及培養(yǎng)、單抗研制,、絕大多數(shù)細(xì)胞,;
·細(xì)胞生長(zhǎng)(快)曲線峰值:1.4×106
·細(xì)胞倍增時(shí)間(短):≤17小時(shí)
·細(xì)胞克隆率(高):≥80%
·內(nèi)含量低;(內(nèi):≤5EU/ml)
·批次間差異小,,質(zhì)量把控嚴(yán)格,;
·經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,性價(jià)比高,。
儲(chǔ)存事項(xiàng):
干冰運(yùn)輸,,盡量避免反復(fù)凍融。
常期存放請(qǐng)將血清保存在-5℃至-2O℃冰箱中凍存,有效期5年,。
重要提示:
產(chǎn)品用于:*供研究使用,,不可用于人或動(dòng)物的體外診斷。
Cell Counting Kit-8(cck8)細(xì)胞增值與毒性檢測(cè)試劑盒是一種基于水溶性四唑鹽的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒,。它在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下,,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為可溶性的橙黃色甲臜(formazan)。甲臜的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。細(xì)胞增殖越快,、細(xì)胞毒性越小、細(xì)胞數(shù)量越多,,則顏色越深,,顏色的深淺與細(xì)胞數(shù)量呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。該產(chǎn)品細(xì)胞毒性小,,對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)沒有影響,,與MTT,XTT,,MTS和WST-1相比,,此法檢測(cè)靈敏度更高,,線性范圍更寬,適用于***篩選,,細(xì)胞增殖測(cè)定,,細(xì)胞毒性測(cè)定和**藥敏實(shí)驗(yàn)。 CCK-8是非放射性的,,允許敏感的比色分析來測(cè)定細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性分析中的活細(xì)胞數(shù)量,。
比MTT、MTS或WST-1更敏感對(duì)細(xì)胞無毒性簡(jiǎn)單步驟(無需解凍) ,,操作更安全,。 有絲分裂是真核生物進(jìn)行細(xì)胞分裂的主要方式。
并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的培養(yǎng)基),,去掉***影響。當(dāng)然***影響比較小的情況下,,可以不更換培養(yǎng)基,,直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。三,、CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的注意事項(xiàng)當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí),,貼壁細(xì)胞的**小接種量至少為1,000個(gè)/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低,,因此推薦接種量不低于2,500個(gè)/孔(100μl培養(yǎng)基),。酚紅和血清對(duì)CCK8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾,可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,。CCK8可以檢測(cè)大腸桿菌,,但不能檢測(cè)酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每次測(cè)定的過程中需要避免細(xì)菌污染,,以免影響結(jié)果,。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個(gè)月,在-20℃下避光可以保存1年,。當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí),,培養(yǎng)板**外一圈的孔**容易干燥揮發(fā),,由于體積不準(zhǔn)確而增加誤差,。一般情況下,**外一圈的孔只加培養(yǎng)基,,不作為測(cè)定孔用,。在培養(yǎng)基中加入CCK8,培養(yǎng)一定的時(shí)間,,測(cè)定450nm的吸光度即為空白對(duì)照,。在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí),,還應(yīng)考慮***的吸收,可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8,,培養(yǎng)一定的時(shí)間,,測(cè)定450nm的吸光度作為空白對(duì)照。金屬對(duì)CCK-8顯色有影響:當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛,、氯化鐵,、***銅會(huì)***5%、15%,、90%的顯色反應(yīng),,使靈敏度降級(jí)。細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,。南京血管平滑肌細(xì)胞增殖凋亡
CCK-8的檢測(cè)操作更簡(jiǎn)單,,無需有機(jī)溶劑.重慶tnk細(xì)胞增殖毒性測(cè)定試劑盒
細(xì)胞增殖有絲分裂是真核生物進(jìn)行細(xì)胞分裂的主要方式。(右上角圖就是常見有絲分裂的開始和結(jié)果)多細(xì)胞生物體以有絲分裂的方式增加體細(xì)胞的數(shù)量,。體細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂是有周期性的,,也就是具有細(xì)胞周期。
細(xì)胞周期 細(xì)胞周期是指連續(xù)分裂的細(xì)胞,,從一次分裂完成時(shí)開始,,到下一次分裂完成時(shí)為止,這是一個(gè)細(xì)胞周期,。
一個(gè)細(xì)胞周期包括兩個(gè)階段:分裂間期和分裂期,。從細(xì)胞在一次分裂結(jié)束之后到下一次分裂之前,是分裂間期,。在分裂間期結(jié)束之后,,就進(jìn)入分裂期。
在一個(gè)細(xì)胞周期內(nèi),,這兩個(gè)階段所占的時(shí)間相差較大,,一般分裂間期大約占細(xì)胞周期的90%到95%;分裂期大約占細(xì)胞周期的5%到10%,。細(xì)胞的種類不同,,一個(gè)細(xì)胞周期的時(shí)間也不相同。 重慶tnk細(xì)胞增殖毒性測(cè)定試劑盒
上海儒安生物科技有限公司是一家生產(chǎn)型類企業(yè),,積極探索行業(yè)發(fā)展,,努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè),,以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神,、專業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品,。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),,具有細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。上海儒安生物科技自成立以來,,一直堅(jiān)持走正規(guī)化,、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持,。