紅細胞裂解液
產(chǎn)品說明:
紅細胞裂解液,,為10X紅細胞裂解液,,經(jīng)過優(yōu)化配方,用于從人或鼠等的血液或標本中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液,。此溶液中主要有效成分為氯化銨,。使在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞,。本裂解液經(jīng)過無菌過濾,處理過的血液或細胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng),、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測,。
注意事項:
對于微量或少量的血液樣品,可以在一步中不進行離心棄上清的操作,,直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液,,并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液,,裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠,,對于人的外周血,宜延長裂解時間至10分鐘,,但通常不宜超過15分鐘,,并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續(xù)步驟相同,。 細胞的凍存密度一般為?北京怎么配制細胞凍存液
埃澤思生物細胞凍存液,、細胞消化液和胰酶消化溶液三項產(chǎn)品完成醫(yī)療器械分類界定2019年9月20日,,埃澤思(福建)生物有限公司向福建省食品藥品監(jiān)督管理局提交三項產(chǎn)品:細胞凍存液、細胞消化液,、胰酶消化溶液產(chǎn)品分類界定申請,。經(jīng)過**答辯,以及監(jiān)管部門批準,,依據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局相關(guān)文件,,**終正式將埃澤思生物科技有限公司的細胞凍存液、細胞消化液和胰酶消化溶液三種產(chǎn)品按照醫(yī)療器械管理,,批準進行醫(yī)療器械備案,。(圖1)以上信息可在中國藥監(jiān)醫(yī)療器械分類系統(tǒng)中進行查詢(圖2,3),。以下將對三項產(chǎn)品進行具體介紹:北京怎么配制細胞凍存液細胞凍存的方法與步驟?
細胞冷凍注意事項:? (1)欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好(logphase)且存活率高之狀態(tài),,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其特有性質(zhì),,例如hybridoma應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生,。? ? 上海博世學(xué)汽車美容貼膜,學(xué)歷+技能,,保障就業(yè) 廣告 學(xué)汽車美容貼膜,,上海博世汽車美容培訓(xùn)班,學(xué)費免息分期付款,,0基礎(chǔ)即可入學(xué),, 查看詳情 > (2)細胞在液氮中可長期凍存無限時間,而不會影響細胞活力,;在-70度可保存數(shù)月,。?
細胞復(fù)蘇
1. 從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,,并不時搖動令其盡快融化,。
2. 從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,,用吸管吸出細胞懸液,,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻,;
3. 離心,, 1000rpm,5min,;
4. 棄去上清液,,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,,接種培養(yǎng)瓶,,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
5. 次日更換一次培養(yǎng)液,,繼續(xù)培養(yǎng),。注意事項1.從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但比較好為對數(shù)生長期細胞,。在凍存前***比較好換一次培養(yǎng)液,;
2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,,以免***,;
3.凍存和復(fù)蘇比較好用新配制的培養(yǎng)液。 細胞凍存液的配制方法是什么?
細胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO或甘油,、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液,;取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,,用PBS清洗,。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來,;離心1000rpm,,5min;去除胰蛋白酶,,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,,計數(shù),,調(diào)節(jié)凍存液中細胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細胞分裝入凍存管中,,每管1~1.5ml,;在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者,;凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min,;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min,;到-100℃時,,則可迅速浸入液氮中。減少細胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。重慶凍細胞凍存液要立刻放入冰箱嗎
細胞的凍存密度一般是多少?北京怎么配制細胞凍存液
凍存細胞類型:臍血及臍帶組織、外周血,、間充質(zhì)干細胞,、多能干細胞,、組織樣本等
① 用于減輕冷凍和解凍復(fù)蘇期間由溫度引起的分子應(yīng)激反應(yīng)
② 分別以2%、5%或10%USP級的二甲基亞砜(DMSO)預(yù)先配制即用型細胞凍存液
凍存細胞類型:臍血及臍帶組織,、外周血和骨髓
① BloodStor®55-5以55%(重量/體積)的DMSO(USP)級,、5%(重量/體積)的葡萄糖-40(USP)級和注射液(WFI)級別的水預(yù)先配制
② BloodStor®100含有**(重量/體積)的DMSO(USP級)
北京怎么配制細胞凍存液
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