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通用型無血清轉(zhuǎn)染試劑一次加多少

來源: 發(fā)布時間:2021-09-15

細胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗,。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù),。2.操作簡便,、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.pei轉(zhuǎn)染試劑說明書是什么?通用型無血清轉(zhuǎn)染試劑一次加多少

簡介:

X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系,。

優(yōu)勢:

1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,,室溫穩(wěn)定,。

2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率,。

3.使用細胞毒性低的試劑,,結(jié)果相關性好.

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞,。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡). 湖北轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒的比例包括常見細胞類型,、干細胞,、原代細胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果,。


在選擇轉(zhuǎn)染方法時,,需考慮您希望輸送的運載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細胞類型,。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng),。


我們提供了各種DNA、siRNA,、寡核苷酸和RNA輸送選擇,,讓您可以對自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細胞無毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,是因為核酸存在,,而不是因為試劑需要的優(yōu)化工作更少—針對大多數(shù)細胞類型提供了快速,、簡便的實驗方案


連續(xù)細胞系 具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理,。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。




細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細胞分析的多種實驗,。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù),。2.操作簡便、節(jié)省時間,,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。

對 HepG2 細胞轉(zhuǎn)染效率的比較

右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細胞(在膠原預處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng))。在轉(zhuǎn)染 48 小時之后,,用流式細胞儀檢測 GFP 陽性細胞(%)和熒光強度,。

左圖:血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑(升級版)對在 HepG2 細胞的轉(zhuǎn)染效率。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細胞(生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上)---無血清和***,,10% 血清和***的存在,,轉(zhuǎn)染 5 小時后換液和不換液。

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將20μL轉(zhuǎn)染復合物加入孔中的細胞懸液中,,前后移動培養(yǎng)皿,,混合均勻;通用型無血清轉(zhuǎn)染試劑一次加多少

羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,,升級版的多組分混合試劑,,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,,尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn),。

兩種試劑對CHO-K1 細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,,B和D是明場顯微圖. 與競爭產(chǎn)品比較,,X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性

不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENE HP 試劑遠優(yōu)于其他試劑

超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證

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