根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)皿的大小加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基后進(jìn)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。保存條件：4℃保存,，有效期一年,。若長(zhǎng)不用可凍存于-20℃，有效期三年,。

產(chǎn)品質(zhì)量：無(wú)血清細(xì)胞凍存液經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的內(nèi),，滲透壓,，pH檢測(cè)，并經(jīng)過(guò)0.1um濾膜過(guò)濾,，確保產(chǎn)品不含有細(xì)菌,，支原體等污染,。

注意事項(xiàng)：1.請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存，由于DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,，凍存細(xì)胞分裝后應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱，減少在室溫存放時(shí)間,。如遇特殊情況，可先短暫放置于4℃并盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱,。 “細(xì)胞凍存液的細(xì)胞存活率和活力高,，批次性差異小.北京配制好的細(xì)胞凍存液使用說(shuō)明

細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油,、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液,；2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液,，用PBS清洗。3.去除PBS,，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)；4.離心1000rpm,，5min,；5.去除胰蛋白酶,，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的**終密度為5×106/ml～1×107/ml,；6.將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5ml,；7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,，凍存時(shí)間及操作者,；8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí),，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管,，移入液氮容器內(nèi),。廣州完全培養(yǎng)基和細(xì)胞凍存液需要4度預(yù)冷細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.

細(xì)胞凍存常用凍存液的成分如下：

20％血清（FBS）,、10％DMSO、70％1640培養(yǎng)液,；或90％血清（FBS）、10％DMSO,，更可防止細(xì)胞內(nèi)冰晶形成,。將DMSO和FBS加入DMEM中,，各自含量占總體積的10%，然后濾膜過(guò)濾后分裝保存?zhèn)溆谩?

注意事項(xiàng)：

1.DMSO 不用高壓滅菌;DMEM不能高溫高壓滅菌,，可以過(guò)濾除菌。

2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存,。

3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(體積比)。

DMSO在凍存液中的作用： DMSO在4℃時(shí)對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性,，分子量小,、溶解度大,、易透過(guò)細(xì)胞膜，降低細(xì)胞外未結(jié)冰溶液中溶質(zhì)濃度,，使細(xì)胞免受高濃度溶質(zhì)的損傷,細(xì)胞內(nèi)水分也不會(huì)過(guò)分外滲，避免了細(xì)胞過(guò)分脫水皺縮,；DMSO與水分子結(jié)合,，可使冰點(diǎn)下降,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶損傷,。

凍存液儲(chǔ)存時(shí)間一般比較短,，不能滿足時(shí)間跨度大的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的需求,。且這樣人力和時(shí)間成本大，人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)了不穩(wěn)定性,。

無(wú)血清即用型凍存液順應(yīng)科技發(fā)展應(yīng)運(yùn)而生，西寶生物經(jīng)銷(xiāo)多種日本進(jìn)口wako品牌,、適合不同細(xì)胞的無(wú)血清細(xì)胞凍存液，可以滿足多層次的實(shí)驗(yàn)需求,，并給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)簡(jiǎn)便、可靠,、高效的新體驗(yàn)，品種齊全,，質(zhì)量保證。BAMBANKER® 無(wú)血清細(xì)胞凍存液：BAMBANKER是一種日本原裝進(jìn)口含DMSO的無(wú)血清細(xì)胞凍存液,，均無(wú)不明動(dòng)物源成分,，高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為實(shí)驗(yàn)效果帶來(lái)保證,。不需要進(jìn)行程序降溫,，可在-80℃長(zhǎng)期保存細(xì)胞（**細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）,。 細(xì)胞凍存液在細(xì)胞建株和建系中，及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的,。

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力,。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷,。

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：

慢凍速融,，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH,，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡,。 細(xì)胞凍存液可以放多久?怎么配制細(xì)胞凍存液怎么樣

細(xì)胞凍存液具體有哪些?北京配制好的細(xì)胞凍存液使用說(shuō)明

細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過(guò)程中，在培養(yǎng)器具,、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),，而且細(xì)胞一旦離開(kāi)***開(kāi)始原代培養(yǎng)，它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化,。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久,；細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中，溫度達(dá)-196℃,，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下,，細(xì)胞內(nèi)水分透出,，減少了冰晶形成,，從而避免細(xì)胞損傷,。北京配制好的細(xì)胞凍存液使用說(shuō)明

上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號(hào)2幢J1718室，是一家專業(yè)的從事生物技術(shù),、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù),、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢,、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,、技術(shù)服務(wù),，軟件開(kāi)發(fā),，電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),，化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品,、監(jiān)控化學(xué)品,、民用物品、易制毒化學(xué)品),、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷(xiāo)售。公司,。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù)，以誠(chéng)信,、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨,，以建上海儒安生物產(chǎn)品為目標(biāo)，努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè),。公司不僅*提供專業(yè)的從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù),、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢,、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),，軟件開(kāi)發(fā),，電子商務(wù)(不得從事增值電信,、金融業(yè)務(wù))，化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品,、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品,、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷(xiāo)售,。,，同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系，為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù),。自公司成立以來(lái),，一直秉承“以質(zhì)量求生存,，以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營(yíng)理念，始終堅(jiān)持以客戶的需求和滿意為重點(diǎn),，為客戶提供良好的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液,，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體,，從而使公司不斷發(fā)展壯大,。