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南京懸浮細(xì)胞凍存液成分

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-14

一、細(xì)胞冷凍保存?1.材料:? 生長(zhǎng)良好之培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮培養(yǎng)基,、DMSO(Sigma?D-2650),、無(wú)菌塑料冷凍保存管(Nalgene?5000-0020)、0.4%(w/v)trypan?blue(GibcoBRL15250-061),、血球計(jì)數(shù)盤與蓋玻片、等速降溫機(jī)(KRYO10SeriesII)? 2,、冷凍保存方法:? (1)傳統(tǒng)方法:?冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)--->液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。? -20℃不可超過(guò)1小時(shí),,以防止胞內(nèi)冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。? (2)程序降溫:利用已設(shè)定程序的等速降溫機(jī)以-1~-3℃/分鐘之速度由室溫降至(-80℃以下)-120℃,,再放在液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑.南京懸浮細(xì)胞凍存液成分

胞培養(yǎng)凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的低溫保存完全培養(yǎng)基,。              

保護(hù)您的細(xì)胞及研究結(jié)果:

從低溫保存復(fù)融細(xì)胞后,,細(xì)胞復(fù)蘇率和活力增加即用型凍存混合物——不需逐次用多種試劑自行配制凍存液Ordering Information貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格單價(jià) (CNY)數(shù)量12648010Recovery? Cell Culture Freezing Medium50 mL2,436.00為什么選擇 Recovery? 細(xì)胞培養(yǎng)凍存培養(yǎng)基?為確保細(xì)胞培養(yǎng)能快速獲得準(zhǔn)確結(jié)果,,妥當(dāng)?shù)蜏乇4婕?xì)胞是您的首要考慮事項(xiàng)之一,。  富含大量高活力細(xì)胞的穩(wěn)健、健康細(xì)胞培養(yǎng)可以讓您更快開展試驗(yàn),,同時(shí)對(duì)結(jié)果更有信心,。在貼壁和懸浮細(xì)胞系的低溫保存中,Recovery? 可使細(xì)胞活力平均增加25%Recovery? 是一種優(yōu)化的完全營(yíng)養(yǎng)成分配方,,可以避免繁雜的DMSO混勻操作 上海細(xì)胞凍存液要立刻放入冰箱嗎無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液加入適量的細(xì)胞凍存液于離心管中,,調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至1~5×106 /ml;

細(xì)胞類型:源于人多能干細(xì)胞的神經(jīng)祖細(xì)胞(NPCs)

用于凍存在神經(jīng)誘導(dǎo)后的任何時(shí)間通過(guò)STEMdiffTM神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)生成的NPCs

解凍復(fù)蘇的NPCs具有可重復(fù)性的高回收率,表型正常,,且保持了可擴(kuò)增及分化為神經(jīng)元,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和其它神經(jīng)細(xì)胞類型的潛能

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱規(guī)格貨號(hào)mFreSRTM10 x 5 mL小管包裝0585450 mL05855FreSRTM-S50 mL05859STEMdiffTM神經(jīng)祖細(xì)胞凍存液100 mL05838MesenCultTM-ACF 凍存液50 mL05490


用于凍存在神經(jīng)誘導(dǎo)后的任何時(shí)間通過(guò)STEMdiffTM神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)生成的NPCs

細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,,內(nèi)部任何的物理?yè)p傷對(duì)于它都是致命的。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰,。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰,,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,,隨著溫度的降低,,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液好嗎?

細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油,、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,,用PBS清洗,。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái),;4.離心1000rpm,,5min;5.去除胰蛋白酶,,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),,調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml,;6.將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml,;7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,,凍存時(shí)間及操作者;8.凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min,;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),,則可迅速浸入液氮中,。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜,,取出凍存管,,移入液氮容器內(nèi)。細(xì)胞凍存液常用比例是多少?廣州快速細(xì)胞凍存液要立刻放入冰箱嗎

減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。南京懸浮細(xì)胞凍存液成分

細(xì)胞復(fù)蘇佩戴眼鏡和手套,從液氮中取出凍存的細(xì)胞管,。迅速放入38℃水浴中,,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其完全融化,,然后在無(wú)菌條件下取出細(xì)胞。1200rpm/min離心5-10min,,棄去上清,,加入適量培養(yǎng)液混勻后接種于培養(yǎng)瓶中,次日更換一次培養(yǎng)液,。

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇操作步驟:

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇采取“慢凍快融”的原則,,慢速冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水份滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)形成冰晶的機(jī)會(huì),快融以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,,避免慢速融化水份滲入細(xì)胞內(nèi),,再次形成胞內(nèi)冰晶造成對(duì)細(xì)胞的損傷。 南京懸浮細(xì)胞凍存液成分

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