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組織熒光染料納米

來源: 發(fā)布時間:2024-06-05

羅丹明123一種可對活細胞線粒體染色的細胞染色試劑,。羅丹明123可透過細胞膜且在活細胞的線粒體內(nèi)聚集,,并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測線粒體膜電位,,也常用于細胞凋亡檢測,。由于細胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強度之間有相關(guān)性,此熒光染料被應(yīng)用于檢測細胞內(nèi)的ATP,。羅丹明123的比較大激發(fā)波長為507nm,,比較大發(fā)射波長為525nm。在熒光顯微鏡下觀察,,呈現(xiàn)黃綠色熒光,。

一:工作液配制用緩沖液或者預(yù)熱的培養(yǎng)液直接稀釋儲存液到需要的工作液濃度(1~20μM),充分混勻,。具體的工作液濃度使用者要根據(jù)自身實驗體系進行調(diào)整,。【注意】:對于細胞實驗,,要控制好總體稀釋倍數(shù),,DMSO在培養(yǎng)液中的濃度不能超過0.1%,以避免DMSO對細胞的影響,。

二:熒光顯微鏡觀察1,、用載玻片準備細胞。細胞數(shù)目應(yīng)為5×104~5×105個/mL,。2,、在載玻片上孵育細胞,,用PBS或HBSS洗滌細胞。3,、將Rhodamine123工作液加入載玻片并在37℃下孵育30min至1小時,。4、去除Rhodamine123溶液并用培養(yǎng)液洗滌細胞(洗滌細胞后如果要固定,,加入10%福爾馬林緩沖液并孵育15~20min,,接著用PBS洗滌)。5,、熒光顯微鏡觀察細胞,。 南京星葉生物熒光染料標記蛋白。組織熒光染料納米

SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,,電泳級)儲存條件及注意事項4℃避光可保存12個月。本品用DMSO溶解,,因DMSO的熔點是18.5℃,,使用前請放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點●無毒性:屬花菁類染料,,容易生物降解,,無致*毒性?!耢`敏度高:至少可檢出20pgDNA,,高于EB染色法25~100倍?!裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘枏?,背景信號低?!癫僮骱唵危簾o須脫色或沖洗,,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察?!襁m用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠,、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等,?!袷褂梅奖悖簩Ψ肿由飳W(xué)中常用的酶(如:Taq酶、反轉(zhuǎn)錄酶,、內(nèi)切酶,、T4連接酶等)沒有抑制作用?!窠?jīng)濟:價格比銀染便宜,。組織熒光染料納米染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族,,用于標記細胞膜和疏水性組織。

InvitrogenCy3染料是一種明亮的橙色熒光染料,,可使用532nm激光線激發(fā),,并使用TRITC(四甲基羅丹明)濾光片組進行可視化。除了免疫細胞化學(xué)應(yīng)用,,Cy3染料通常用于標記核酸,。發(fā)光說明:Cy3熒光團也是親脂性神經(jīng)元和長期DiI細胞追蹤試劑的基礎(chǔ),該試劑添加烷基尾(≥12個碳)添加到**熒光團上,。Cy3染料是用于成像,、流式細胞術(shù)和基因組應(yīng)用的蛋白質(zhì)和核酸結(jié)合物的傳統(tǒng)橙色熒光標簽。它也是經(jīng)典親脂性示蹤劑DiI及其變體的基礎(chǔ),。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu),,Cy3可分為普通Cy3(常簡稱Cy3)和磺化Cy3(Sulfo-Cy3)。Cy3水溶性較低,,在水相標記反應(yīng)時常常需要使用有機共溶劑,,常用有機溶劑包括DMF,DMSO和乙腈等,?;腔疌y3是在Cy3的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上磺化的產(chǎn)物,附帶2個或3個磺酸根離子,。由于磺化效應(yīng),,磺化Cy3的亮度比Cy3稍亮,熒光穩(wěn)定性也提高,,可賴受更長時間的曝光,。磺化Cy3水溶性極高,,所以在標記反應(yīng)中不需要使用有機共溶劑,,特別適合標記蛋白等對有機溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性極好,,并且染料分子本身帶電荷,,標記到蛋白表面后不會引發(fā)疏水性蛋白聚集,提高熒光標記產(chǎn)物的穩(wěn)定性,。當(dāng)然,,磺化Cy3-NHS也可溶于甲醇,DMSO,,DMF等有機溶劑,,標記反應(yīng)也可以在純有機溶劑中進行。

Hoechst33342是一種可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑,,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光,。Hoechst33342常用于細胞凋亡檢測,,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst33342-DNA的激發(fā)和發(fā)射波長分別為350nm和460nm,??扇苡谒?.染色程序:(1)用PBS或合適的緩沖液制備10~50μMHoechst33342染料,。(2)將1/10細胞培養(yǎng)基體積的Hoechst染料溶液加入細胞培養(yǎng)物中(可以用1/10濃度的Hoechst染料緩沖液代替培養(yǎng)基),。(3)在37℃培養(yǎng)細胞10~20分鐘。(4)用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次,。(5)用帶有350nm激發(fā)波長,,460nm發(fā)射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。Super Fluor 488(效果同Alexa Fluor 488)標記蛋白,。

注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,,從而確定比較高信號檢測時間和信號平臺期。保存和操作的過程中都要避光,。另外水溶性儲存液過濾除菌后,,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融,。如果有條件,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),,穩(wěn)定性和保存時間更長,。 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,,確定比較好信號平臺期和比較好的檢測時間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性,。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來看,,鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽,,尤其是體內(nèi)實驗。兩者功效相同,。 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,,使其非常適合用作激光染料,、熒光探針和顏料。河北熒光染料標記

D-熒光素鉀鹽南京星葉生物科技有限公司,。組織熒光染料納米

熒光染料***用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,,如流式細胞術(shù),、熒光顯微鏡和免疫組化等,其中熒光淬滅是一個關(guān)鍵的考量因素,,因為它直接影響到實驗結(jié)果的可靠性和準確性,。FITC(異硫氰酸熒光素)是一種常用的綠色熒光染料,具有較高的熒光量子產(chǎn)率和激發(fā)效率,。然而,,F(xiàn)ITC的一個主要缺點是容易受到環(huán)境因素的影響,如pH值,、溫度,、溶劑和離子強度等,從而導(dǎo)致熒光淬滅,。此外,,F(xiàn)ITC的光穩(wěn)定性相對較低,長時間的光照會導(dǎo)致其熒光強度降低,。CY5.5是一種遠紅外熒光染料,,具有較長的激發(fā)和發(fā)射波長,因此適用于多色熒光標記和深組織成像,。CY5.5相對于FITC來說,,具有更好的光穩(wěn)定性,不易受到環(huán)境因素的影響,。此外,,CY5.5的熒光量子產(chǎn)率也較高,使其在熒光標記實驗中表現(xiàn)出色,。AlexaFluor647是另一種常用的紅色熒光染料,,具有與CY5.5相似的長波長激發(fā)和發(fā)射特性。AlexaFluor647的優(yōu)點是光穩(wěn)定性較好,,可以承受長時間的光照而不易淬滅,。此外,它在多種溶劑和pH值范圍內(nèi)都能保持穩(wěn)定的熒光性能,,因此在復(fù)雜的生物樣本中表現(xiàn)出色,。

南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列(效果同Alexa Fluor 系列),質(zhì)優(yōu)價廉,。 組織熒光染料納米