脂質(zhì)復(fù)合物又稱陽離子脂質(zhì)-核酸復(fù)合物(CLNACs),，是由非離子核酸與陽離子脂質(zhì)體（CLs）表面結(jié)合，**終形成多層脂質(zhì)-核酸復(fù)合物而形成的,。帶負(fù)電荷的核酸被吸引到帶正電荷的囊泡表面,，**初與停靠在陽離子囊泡表面的核酸分子形成復(fù)合物,，然后發(fā)展到核酸分子持續(xù)粘在脂質(zhì)分子上的階段,，脂質(zhì)雙分子層圍繞緊實的核脂質(zhì)顆粒。復(fù)合物形態(tài)的這種異質(zhì)性可能歸因于囊泡的脂質(zhì)組成,、復(fù)合物形成的方式,、脂質(zhì):核酸比例、核酸結(jié)構(gòu)的大小,、試劑的批次差異以及用于處理和可視化這些復(fù)合物的技術(shù),。除了靜電吸引外，疏水相互作用被認(rèn)為有助于脂質(zhì)和核酸之間的復(fù)合物形成,。因此,，根據(jù)正電荷(陽離子脂質(zhì))與負(fù)電荷(核酸上的磷酸基)的電荷比，脂質(zhì)體可能通過與細(xì)胞表面的蛋白聚糖基團等帶電殘基的靜電相互作用,，或通過與質(zhì)膜疏水區(qū)域的疏水相互作用進入細(xì)胞,。陽離子脂質(zhì)體合成中常用的分子是中性脂質(zhì)二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。體外轉(zhuǎn)染試劑企業(yè)

化學(xué)轉(zhuǎn)染可分為基于脂質(zhì)體或非基于脂質(zhì)體,?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑是一種化學(xué)物質(zhì)，它能夠形成帶正電的脂質(zhì)聚集體,，這些聚集體可以與宿主細(xì)胞的磷脂雙分子層順利融合,，從而允許外來遺傳物質(zhì)以**小的阻力進入。另一方面,，非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑可進一步分為幾類,，包括磷酸鈣、樹狀大分子,、聚合物,、納米顆粒和非脂質(zhì)體。磷酸鈣是轉(zhuǎn)染中使用的低價的化學(xué)物質(zhì)之一,，轉(zhuǎn)染涉及將帶正電的鈣離子(Ca2+)與帶負(fù)電的核酸結(jié)合,，形成沉淀，然后被宿主細(xì)胞吸收,。然而,，磷酸鈣轉(zhuǎn)染的成功率較低,，需要事先優(yōu)化才能達(dá)到較高的轉(zhuǎn)染效率。樹狀大分子是三維的,、高度支化的有機大分子,，可以與核酸形成復(fù)合物，作為一種替代的非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,，它優(yōu)于磷酸鈣,。然而，使用樹狀大分子的轉(zhuǎn)染效率仍然低于病毒載體和脂質(zhì)體試劑,。陽離子聚合物也可以與帶負(fù)電荷的核酸形成復(fù)合物,，這有助于細(xì)胞通過內(nèi)吞作用吸收遺傳物質(zhì)。與病毒載體相比,，陽離子聚合物產(chǎn)生的細(xì)胞毒性較小,，但效率也較低。納米顆粒由于其體積小,，增強了核酸進入宿主細(xì)胞的能力,，正在成為非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的替代選擇。體外轉(zhuǎn)染試劑企業(yè)共轉(zhuǎn)染是將一種以上類型的核酸引入真核細(xì)胞的過程,。

基因和RNAi***在臨床上的應(yīng)用需要安全高效的載體,。迄今為止，核酸***的兩種主要方法是基于病毒和非病毒載體,。與病毒載體相關(guān)的安全問題有很多:誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的風(fēng)險、不必要的突變和**,。因此,，在開發(fā)基于脂質(zhì)或聚合載體的非病毒載體是勢在必行的。1965年,，Vaheri和Pagano引入了二乙基氨基乙基修飾的葡聚糖,，這是第一種用于基因傳遞的聚合物。1987年,，F(xiàn)elgner引入了DOTMA,，這是第一種用于DNA轉(zhuǎn)染的陽離子脂質(zhì)。從那時起,，大量不同的脂質(zhì)和聚合物被開發(fā)出來,。南京星葉生物正是利用將核酸封裝在納米級脂質(zhì)體囊泡中的技術(shù)，開發(fā)出了Gemate系列轉(zhuǎn)染試劑,。

**近一項與抗血管生成基因傳遞高度相關(guān)的發(fā)現(xiàn)是,，陽離子脂質(zhì)體（CLs）選擇性地靶向**的血管系統(tǒng)。陰離子或電中性脂質(zhì)體沒有發(fā)現(xiàn)這種作用,。Campbell和他的同事[95]發(fā)現(xiàn),，與電中性脂質(zhì)體相比,，使用CLs在**血管內(nèi)皮細(xì)胞(VECs)中積累更多，CLs通過添加5mol%聚乙二醇來穩(wěn)定,。在兩種人類**類型(LS174T和MCAIV)和兩個位置(顱窗和背側(cè)皮膚褶腔)中發(fā)現(xiàn)了**VECs的選擇性遞送,。**血管中囊泡的分布是不均勻的，這可能與該技術(shù)是否足以根除足夠數(shù)量的**VECs以實現(xiàn)**消退反應(yīng)有關(guān),。有趣的是,，注射后24小時，脂質(zhì)體上50%的摩爾電荷***增加了小鼠肺部的積聚,。轉(zhuǎn)染是將外來核酸傳遞到真核細(xì)胞中以修飾宿主細(xì)胞的遺傳組成的過程,。

轉(zhuǎn)染是將外源核酸送入細(xì)胞的過程，其目的是使外源基因編碼的蛋白能夠在細(xì)胞中表達(dá),。這些編碼序列通常由質(zhì)粒DNA攜帶到細(xì)胞中,，以研究其未知的功能或用于特定的***目的。此外,，降低基因表達(dá)的siRNA也是核酸轉(zhuǎn)染的靶標(biāo),。通過siRNA的敲低作用，研究人員可以操縱愈合基因的表達(dá)來研究基因的功能和相互作用,。siRNA在**研究,、基因***、組織工程等方面發(fā)揮著重要作用,。mRNA曾被認(rèn)為不適合用于基因***藥物,，因為它易于降解。然而,，研究人員通過化學(xué)修飾提高了其穩(wěn)定性,，使其成為表達(dá)外源基因的理想核酸藥物。mRNA疫苗已用于預(yù)防COVID-19,，許多用于*****的mRNA藥物正在開發(fā)中,。裸核酸分子被細(xì)胞吸收的效率極低。這是因為核酸是親水,、帶負(fù)電的生物分子,，難以接近疏水、帶負(fù)電的脂質(zhì)細(xì)胞膜,。因此,，核酸分子必須通過載體傳遞到細(xì)胞中。核酸載體有兩種:病毒載體和非病毒載體,。在轉(zhuǎn)染有效性和包裝能力方面,，病毒載體表現(xiàn)良好。然而,，病毒載體的缺點也不容忽視,，比如容易引發(fā)炎癥反應(yīng)和基因突變,。而非病毒載體的材料來源豐富，化學(xué)結(jié)構(gòu)可控,，易于大量制備;因此,，它們在核酸轉(zhuǎn)染中具有不可替代的作用。選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑可能取決于幾個因素,，包括轉(zhuǎn)染核酸的類型和轉(zhuǎn)染的復(fù)雜性(單轉(zhuǎn)染或共轉(zhuǎn)染),。杭州轉(zhuǎn)染試劑試用

在轉(zhuǎn)染中，DNA通常通過病毒或非病毒載體(如質(zhì)粒)轉(zhuǎn)運到宿主細(xì)胞中,。體外轉(zhuǎn)染試劑企業(yè)

脂質(zhì)復(fù)合物(CLNACs)通過網(wǎng)格蛋白參與的內(nèi)吞作用進入細(xì)胞,，并被困在核內(nèi)小體中，從這些囊泡結(jié)構(gòu)中釋放出來,，進入核周區(qū)域,，***進入細(xì)胞核。內(nèi)吞作用在一定程度上取決于脂質(zhì)體載體的物理化學(xué)性質(zhì),。Friend和同事描述了可能由脂質(zhì)體與核膜融合而形成的囊泡和網(wǎng)狀核內(nèi)膜,。**近有研究表明，很大一部分從核內(nèi)體釋放到細(xì)胞質(zhì)質(zhì)的質(zhì)粒由于與細(xì)胞質(zhì)中的大離子凝聚劑結(jié)合而失去活性,。這可能解釋了脂質(zhì)轉(zhuǎn)染所觀察到的低且可變的轉(zhuǎn)染率,。雖然這些脂質(zhì)載體從細(xì)胞外部到細(xì)胞核的路徑尚未完全確定，但核酸能夠產(chǎn)生其效果本身就是一項驚人的壯舉,。至少對于質(zhì)粒而言,，較小的結(jié)構(gòu)體比較大的質(zhì)粒具有更高的轉(zhuǎn)染率。核酸外排,，雖然不是常見的報道,，但也被證明會發(fā)生。體外轉(zhuǎn)染試劑企業(yè)