三、脂質(zhì)體組成對轉(zhuǎn)染效率的影響不同脂質(zhì)組成的影響：研究發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體的組成對不同類型細胞的轉(zhuǎn)染效率有影響。例如,，四種不同的DOTAP與DOPE重量比的脂質(zhì)體配方對不同細胞系的轉(zhuǎn)染效率不同。Huh7和AGS細胞的比較好脂質(zhì)體組成是T1P0和T3P1,；COS7細胞是T3P1和T1P1；A549細胞是T1P1和T1P36,。脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的影響：脂質(zhì)體復(fù)合物的形狀會隨著DOPE比例的增加從層狀結(jié)構(gòu)變?yōu)榈沽切谓Y(jié)構(gòu),，但在所有使用的細胞系中，特定結(jié)構(gòu)在轉(zhuǎn)染效率上沒有明確的優(yōu)勢6,。四,、其他因素的影響血清的影響：對于某些細胞，血清的存在會影響轉(zhuǎn)染效率,。如Siha細胞在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)時轉(zhuǎn)染效率更高,，而在Caco-2細胞的轉(zhuǎn)染中,，血清在本實驗室條件下并不影響轉(zhuǎn)染效率19,。細胞傳代次數(shù)：Caco-2細胞在2-5次細胞傳代時轉(zhuǎn)染效率比較高9。綜上所述,，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染對不同類型細胞的影響存在多方面的差異,，包括轉(zhuǎn)染效率、影響因素以及脂質(zhì)體組成等,。在進行脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染實驗時,，需要根據(jù)不同的細胞類型優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，以獲得比較好的轉(zhuǎn)染效果,。提高 RNA 轉(zhuǎn)染效率是 RNA 研究領(lǐng)域中的重要課題,。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑幫轉(zhuǎn)染

聯(lián)合使用其他技術(shù)優(yōu)化DNA和RNA轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)染試劑在肌肉細胞中的應(yīng)用：在C2C12細胞中，比較了五種商業(yè)轉(zhuǎn)染試劑（Lipofectamine®3000,、Viafect?,、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的轉(zhuǎn)染效率7,。通過優(yōu)化DNA:轉(zhuǎn)染劑比例和細胞密度,，所有試劑都達到了超過60%的轉(zhuǎn)染效率，且對細胞生長和活力的影響有限,。然而,，在C2C12細胞中優(yōu)化的用于DNA轉(zhuǎn)移的條件下，這些試劑對siRNA的轉(zhuǎn)移效率較低，并且對原代肌肉細胞的毒性較高,。這提示在使用轉(zhuǎn)染試劑時,，可以通過聯(lián)合使用其他技術(shù)或優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，以提高轉(zhuǎn)染效率并降低細胞死亡,。例如,，可以進一步研究不同試劑之間的聯(lián)合使用，或者優(yōu)化轉(zhuǎn)染后的培養(yǎng)條件,，以降低細胞毒性,。綜上所述，在不同細胞模型中提高RNA轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效率同時降低細胞死亡,，可以通過選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑,、優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件以及聯(lián)合使用其他技術(shù)等方法來實現(xiàn)。未來的研究可以進一步深入探討不同細胞模型中比較好的轉(zhuǎn)染策略,，以滿足不同研究領(lǐng)域的需求,。福建陽離子轉(zhuǎn)染試劑化學(xué)轉(zhuǎn)染的效率可能取決于幾個因素，如使用的試劑類型,、靶細胞的來源和性質(zhì),，以及選擇的DNA與試劑比例。

選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑GenMute試劑在人肝*細胞模型中的應(yīng)用：在人肝*細胞HepG2和Huh7.5中,，研究對比了脂質(zhì)體類的Lipofectamine?RNAiMAX和HepG2特異性的聚合物類GenMute?兩種轉(zhuǎn)染試劑30,。通過細胞成像分析發(fā)現(xiàn)，GenMute處理的細胞對熒光標(biāo)記的陰性對照siRNA的攝取高于LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染的細胞,。并且,，MTT實驗表明，GenMute轉(zhuǎn)染的細胞比LipofectamineRNAiMAX處理的細胞具有更高的存活率,。這提示在人肝*細胞模型中,，GenMute試劑可能是更適合的轉(zhuǎn)染試劑，在提高轉(zhuǎn)染效率的同時降低了細胞死亡,。siRNA共軛殼聚糖納米顆粒在脊髓損傷模型中的應(yīng)用：在創(chuàng)傷性脊髓損傷（SCI）模型中,，通過制備帶有抗體靶向部分的siRNA共軛殼聚糖復(fù)合物，以抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）的表達,，該復(fù)合物主要靶向M1巨噬細胞31,。實驗結(jié)果表明，Ab-siRNA共軛殼聚糖納米顆粒在體外***降低了M1極化巨噬細胞中的iNOS表達,，具有高轉(zhuǎn)染效率和低細胞毒性,。在體內(nèi)應(yīng)用該納米顆粒后，SCI后的iNOS表達和細胞凋亡均減少,。這說明在特定的病理模型中,，針對性設(shè)計的納米顆粒轉(zhuǎn)染試劑可以在提高轉(zhuǎn)染效率的同時降低細胞死亡。

其他轉(zhuǎn)染試劑：機制概述：例如CALNPRNAi轉(zhuǎn)染試劑，其轉(zhuǎn)染機制可能與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑不同,。該試劑轉(zhuǎn)染效率***高于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑,，同時毒性比較低。其具體轉(zhuǎn)染機制可能涉及對RNA的攝取,、細胞利用率及細胞毒性的綜合作用,。在不同細胞類型中的表現(xiàn)：目前文獻中未明確提及CALNPRNAi轉(zhuǎn)染試劑在特定細胞類型中的具體表現(xiàn)，但研究表明該試劑為難轉(zhuǎn)染細胞的RNA干擾帶來了新的選擇7,。綜上所述,，不同RNA轉(zhuǎn)染試劑在不同細胞類型中的轉(zhuǎn)染機制存在差異，這些差異主要表現(xiàn)在與RNA的結(jié)合方式,、進入細胞的途徑以及在細胞內(nèi)的釋放和作用方式等方面,。了解這些差異對于選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑進行特定細胞類型的RNA轉(zhuǎn)染實驗具有重要意義?；诓《镜霓D(zhuǎn)染,，或者更具體地稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)，涉及使用病毒載體將特定的核酸序列帶入宿主細胞,。

對細胞周期的影響：在微小RNA-1180轉(zhuǎn)染腎*細胞的實驗中,，F(xiàn)CM結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染miR-1180后,，位于G0/G1期的細胞比例明顯增大,，而位于S期和G2/M期的細胞比例明顯下降，表明細胞周期被阻滯在G0/G1期1,。對轉(zhuǎn)染效率的影響：在脂質(zhì)體介導(dǎo)RNA干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染雞成骨細胞條件的優(yōu)化實驗中,，對轉(zhuǎn)染前細胞融合度,、質(zhì)粒質(zhì)量與脂質(zhì)體體積比及轉(zhuǎn)染時間進行優(yōu)化,，在熒光倒置顯微鏡下觀察并計算轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表明,，在轉(zhuǎn)染前細胞融合達到90％以上,，質(zhì)粒DNA與脂質(zhì)體比例為1:2.5時轉(zhuǎn)染效率比較高，并且在轉(zhuǎn)染后48h轉(zhuǎn)染效果比較好3,。在篩選更優(yōu)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的實驗中,，分別用RNAiMax及MessageMax將modGFP轉(zhuǎn)染入MEF細胞，流式分析發(fā)現(xiàn)MessageMax的轉(zhuǎn)染效率為（83.33%±3.23%）,，略高于RNAiMax的（78.77%±6.12%）,，兩者沒有統(tǒng)計學(xué)差異，但是流式分析和熒光顯微鏡觀察均表明MessageMax轉(zhuǎn)染后1周內(nèi)的蛋白翻譯表達效率更高,，是更高效的modRNA轉(zhuǎn)染試劑8,。

RNA 轉(zhuǎn)染試劑的效果受到多種因素的影響，包括細胞類型、轉(zhuǎn)染試劑種類,、轉(zhuǎn)染條件等,。在實際應(yīng)用中，需要根據(jù)具體的實驗需求選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑和優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,，以提高轉(zhuǎn)染效率并減少對細胞的毒性作用,。 常用的物理/機械轉(zhuǎn)染方法包括電穿孔、聲孔,、基因顯微注射和激光照射,。大鼠轉(zhuǎn)染試劑

脂質(zhì)顆粒的加入導(dǎo)致內(nèi)體DNA釋放增加。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑幫轉(zhuǎn)染

優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件MOI值對Lentivirus載體轉(zhuǎn)染許旺細胞的影響：以Lentivirus三質(zhì)粒系統(tǒng)構(gòu)建病毒載體,，在體外對原代大鼠許旺細胞進行轉(zhuǎn)染,，研究不同MOI值（***復(fù)數(shù)）對轉(zhuǎn)染效率的影響32。結(jié)果顯示,，在病毒轉(zhuǎn)染3天后,，各不同MOI值的培養(yǎng)孔中開始出現(xiàn)少量熒光反應(yīng)，第5天時熒光數(shù)量明顯增多,，第7天達到高峰,，第9天與第7天變化不明顯。從細胞轉(zhuǎn)染效率來看,，不同的MOI值效果不同,，MOI值為5和10時轉(zhuǎn)染效率較高。這表明在使用Lentivirus載體轉(zhuǎn)染許旺細胞時,，優(yōu)化MOI值可以提高轉(zhuǎn)染效率,。同時，未提及該轉(zhuǎn)染過程對細胞死亡的影響,，但可以通過進一步的實驗,，如細胞活性檢測等，來確定在提高轉(zhuǎn)染效率的同時對細胞死亡的影響,。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑幫轉(zhuǎn)染