生化實驗室常用的緩沖系主要有磷酸,、檸檬酸,、碳酸,、醋酸、巴比妥酸,、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統(tǒng),，生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因為有時影響實驗結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,，而是緩沖液中的某種離子,。如硼酸鹽、檸檬酸鹽,、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖液都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng),。硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖,。檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合,，所以存在有鈣離子的情況下不能使用,。磷酸鹽：在有些實驗，它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物,，重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來,。而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小,。三羥甲基氨基甲烷：它可以和重金屬一起作用,，但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點時溫度效應(yīng),。這點往往被忽視,，在室溫pH是7.8的Tris緩沖液，4℃時是8.4,，37℃時是7.4,，因此，4℃配制的緩沖液在37℃進行測量時,，其氫離子濃度就增加了10倍,。在pH7.5以下，其緩沖能力極為不理想,。國內(nèi)AVT穩(wěn)定供貨注射級HEPES,。海南高純HEPES生產(chǎn)廠家

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（5）緩沖溶液在穩(wěn)定性方面各顯利弊：①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大,，一般現(xiàn)用現(xiàn)配,。同時需要注意Tris是一級脂肪胺，分子結(jié)構(gòu)中的氨基易與醛類化合物發(fā)生縮合反應(yīng),，是一些生化實驗的抑制劑,。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性，不宜用做注射液或者口服液的緩沖液,。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩(wěn)定性很好,，但磷酸根具有一定的絡(luò)合能力會抑制一些與金屬離子有關(guān)的生化反應(yīng),。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑，但其有多種生物學(xué)效應(yīng),，如：縮短血液凝固時間,、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細胞膜上的陰離子通道等，在一定程度上會影響患者身體狀態(tài),，使用時應(yīng)需注意,。

關(guān)于HEPES緩沖溶液的配制，不同的文獻資料有不同的說法,。根據(jù)用途,，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽,。各種配制方法總結(jié)如下：一,、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.8~8.2),，然后用蒸餾水定容至500ml,，于4攝氏度保存。二,、加少量鹽的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g,、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g,、用0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值,，***定容。三,、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制將1.6gNaCl,、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O,、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸餾水,，用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可,。國內(nèi)AVT注射用HEPES已登記,？

(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液（lmol/L），使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,，**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L,。lmol/L（100x）hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.作者：知乎用戶0mmkBe注射級，低內(nèi)***,、國產(chǎn)化穩(wěn)定供應(yīng),、高性價比注射級HEPES找艾偉拓！吉林HEPES現(xiàn)貨

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注射級氨丁三醇緩沖液優(yōu)點如下：1.Tris堿的堿性較強,，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液,，應(yīng)用范圍廣；2.Tris緩沖液對生物化學(xué)過程干擾很小,，不與鈣,、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀；3.Tris在水中溶解度高,，對很多酶的反應(yīng)是惰性的,；4.Tris緩沖能力高,，在pH7.5-9.0之間有較強的緩沖能力,；5.Tris緩沖劑應(yīng)用***，在生物化學(xué),、分子生物學(xué),、體外診斷、化妝品,、涂料等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用,。注射級HEPES！海南高純HEPES生產(chǎn)廠家

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