高效液相色譜分離原理
空間排阻
(Steric Exclusion Chromatography)
空間排阻色譜法以凝膠(gel) 為固定相,。它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米,。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離,。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質的流動力學體積或分子大小有關,。試樣進入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過,。在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻,,因此就直接通過柱子,首先在色譜圖上出現(xiàn),,一些很小的分子可以進入所有膠孔并滲透到顆粒中,,這些組分在柱上的保留值比較大,在色譜圖上***出現(xiàn),。
通過 Vanquish 二元泵 H 模塊的流暢運送和正確梯度獲得一致結果,。上海Vanquish液相色譜系統(tǒng)廠家報價
獲得準確性,、精密度和靈敏度的新基準。Thermo Scientific Vanquish? Flex 二元 UHPLC 系統(tǒng)與**的二元高壓泵和**的二元溶劑混合具有生物相容性,。該超高效液相色譜系統(tǒng)共享所有 Vanquish 指標,,例如專注于正常運行時間、耐用性和可靠性的設計,。多種檢測選項為您提供您所需要的性能,。Thermo Scientific? Viper? 整個系統(tǒng)采用手擰裝配連接,便于安裝,。該系統(tǒng)尤其適用于高通量分析,,可與質譜儀(MS)無縫聯(lián)用。
將先進的四元溶劑混合技術與 Thermo Scientific? Vanquish? Quaternary Flex 系統(tǒng)相結合,,**終獲得生物兼容 UHPLC 系統(tǒng),。作為 Vanquish UHPLC 產品系列中的一員,Vanquish Quaternary Flex 系統(tǒng)可采用先進的四元低壓泵來設定精確度和靈敏度的新標準,。Vanquish Flex Quaternary 系統(tǒng)秉承了 Vanquish 固有的所有價值理念,,如在設計上主要關注運行時間、穩(wěn)健性和可靠性,。多種檢測選項為您提供您所需要的性能,。Thermo Scientific? Viper? 整個系統(tǒng)采用手擰裝配連接,便于安裝,。該系統(tǒng)是生物制藥和制藥應用的理想之選,。 上海賽默飛世爾Vanquish高效液相色譜系統(tǒng)采購線性達 3000 mAU,噪音級別降至 ±3 μAU,,比較低分散和基線噪音,。
高效液相色譜相關術語
色譜圖(chromatogram)——樣品流經色譜柱和檢測器,所得到的信號-時間曲線,,又稱色譜流出曲線(elution profile),。
基線(base line)——經流動相沖洗,柱與流動相達到平衡后,,檢測器測出一段時間的流出曲線,。一般應平行于時間軸。
噪音(noise)——基線信號的波動,。通常因電源接觸不良或瞬時過載,、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致,。
漂移(drift)——基線隨時間的緩緩變化,。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起,,柱內的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產生漂移,。
賽默飛世爾Vanquish 超高效液相色譜系統(tǒng)產品簡介
Thermo Scientific? Vanquish? Duo UHPLC 系統(tǒng),將兩套梯度流路整合在一個超高效液相系統(tǒng)里,,并能實現(xiàn)三種不同工作流程(雙LC,,串聯(lián)液相或LCMS質譜前端,以及反梯度)這些工作流程可通過節(jié)約時間,、減少每份樣品的成本,、在不額外增加工作臺面的情況下提高儀器設備容量并更加高效地利用資源,以提升生產率,。Vanquish Duo UHPLC 系統(tǒng)可在不影響性能,、穩(wěn)定性或易用性的情況下擴大 Vanquish 平臺的優(yōu)勢。 雙恒溫模式:蒸餾氣體和加壓氣體,。
高效液相色譜法之實例:
高效液相色譜法,,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,,因此不受試樣揮發(fā)性的限制,。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差,、相對分子量**于400以上)的有機物(這些物質幾乎占有機物總數(shù)的75%~80%)原則上都可以應用高效液相色譜法來進行分離,、分析。據統(tǒng)計,,在目前已知的化合物中,,能用氣相色譜分析的大約占20%,而能用液相色譜分析的大約占70~80%,。
1,、環(huán)境中有機氯農藥殘留量分析;
2,、稠環(huán)芳烴的分析,;
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使用適合反向梯度的 Vanquish Duo 提高實驗室定量檢測能力,。上海Vanquish液相色譜系統(tǒng)廠家報價
高效液相色譜的應用
高效液相色譜應用非常***,,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
(1)分離混合物
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,,不受樣品揮發(fā)性的限制,,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的,、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質,。
通過與試樣預處理技術相配合,高效液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,,可分離并同時測定性質上十分相近的物質,,能夠分離復雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,,還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離,。
(2)生化分析
由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度,、速度快,、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優(yōu)點,,因而被廣泛應用到生物化學,、食品分析、醫(yī)藥研究,、環(huán)境分析,、無機分析等各種領域,并已成為解決生化分析問題**有前途的方法,。
(3)儀器聯(lián)用
高效液相色譜儀與結構儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向,。高效液相色譜一質譜聯(lián)用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展,。 上海Vanquish液相色譜系統(tǒng)廠家報價