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穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的...

瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，...

對大多數(shù)細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,，每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格,、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法，PH,水純度,稱量的準度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài),，細胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,，分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴，針對極個別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決,。...

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物,！什么品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好,？速溶型PEI...

細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,，以慢病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見,，其侵染效率可以達到90%以上,，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設(shè)備,，且一分錢一分貨,，性能好的價格也都相對較高。Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑不含動物源成分,。速溶型PEI轉(zhuǎn)染試劑病毒產(chǎn)量細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中常規(guī)的研究手段,，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細胞內(nèi),。目...

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù),，以創(chuàng)新和為價值理念，通過自身研發(fā)團隊,，以及與國內(nèi)外專業(yè)科研團隊強強聯(lián)合,，不斷創(chuàng)新，為生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù),。生物醫(yī)學(xué)工程是綜合應(yīng)用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法,，從工程學(xué)角度在分子、細胞,、組織,、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認識人體的結(jié)構(gòu),、功能和其他生命現(xiàn)象，研究用于防病,、治病,、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料、制品,、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱,。更多關(guān)于PEI相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物,！分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高,。CHO細胞PEI轉(zhuǎn)染試劑蛋白產(chǎn)量PEI在...

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）,。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染,。如果細胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細胞,，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞,。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物,！用PEI轉(zhuǎn)染試劑時,，一般和DNA的比例是多少？血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑品牌線性PEI轉(zhuǎn)染試劑...

PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,，被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000，選擇PEI,，以至于相當長的時間內(nèi),，轉(zhuǎn)染試驗都不順利。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中，順序不可錯,，輕微混勻,，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時，一定要換液,！換含有FBS的完全培養(yǎng)液,！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當提高。PS：事實證明,，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,！哪個品牌...

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。PEI轉(zhuǎn)染試劑有沒有毒性,？CHO細胞PEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率對于某些類型的細胞如HEK-29...

瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，...

材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES,，調(diào)pH值到7.4,，定容至1L,，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆谩７椒ǎ?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)...

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內(nèi)客戶群體,，生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系，以及高風(fēng)險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,，曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗證過的產(chǎn)品和技術(shù),，引入中國市場，開發(fā),、孵育和推廣,，致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國，集中在為細胞/基因領(lǐng)域,、/免疫,，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì),，轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinic...

化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中常用的轉(zhuǎn)染方法,，主要包括兩類：陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學(xué)分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物,。一方面使復(fù)合體整體帶上正電荷（多數(shù)細胞膜表面帶有弱的負電荷,，通過電荷作用吸引復(fù)合體到細胞膜表面）；另一方面對線性的核酸進行濃縮,，使其體積變小更易穿透細胞膜。陽離子聚合物類轉(zhuǎn)染試劑可以說是貧窮實驗室的福音了,。早在2012年就有研究小組在大名鼎鼎的Nature Protocol上發(fā)表了PEI作為轉(zhuǎn)染試劑的詳細方法,，到現(xiàn)在被越來越多的實驗室采用。Polysciences 是一家化學(xué)品制造公司,，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域,。公司成立于1...

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。Polysciences 是一家化學(xué)品制造公司,，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域,。公司成立于19...

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。Polysciences 是一家化學(xué)品制造公司，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域,。公司成立于19...

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材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES,，調(diào)pH值到7.4,，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)...

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注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）,。如有可能,，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染,。如果細胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細胞,，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物！用PEI轉(zhuǎn)染試劑時出現(xiàn)沉淀什么原因,？陽離子聚合物PEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)化方案穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1...

瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后...

接種細胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的...

隨后，開拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品,，使組織除了石蠟包埋外,，還能夠包埋在塑料塊中；開發(fā)染料和染色劑,，以實現(xiàn)更好的樣品觀測方式,。與government合作，開發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球,。與美國國家cancer中心合作,，開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗,。繼而開發(fā)出超順磁珠,，用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究,。Polysciences的高純度單體和聚合物產(chǎn)品在醫(yī)療器械中有許多應(yīng)用,，并不斷開發(fā)和增強其性能。近期業(yè)務(wù)擴展到電子產(chǎn)品,，Polysciences的精密微粒子產(chǎn)品拓展了納米技術(shù)應(yīng)用中測量精度,。公司秉承為應(yīng)用而研發(fā)，目前已擁有超過3000種產(chǎn)品,。上海曼博生物為Polysci...

細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中常規(guī)的研究手段,，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染,，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,，以慢病毒,、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見，其侵染效率可以達到90%以上,，但常因安全性等問題,，很多實驗室對其敬而遠之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因,，無論哪一種都需要特定的設(shè)備，且一分錢一分貨,，性能好的價格也都很性感,。 Polysciences是一家化學(xué)品制造公司，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域,。公司成立于1961年,，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。上海曼博生...

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內(nèi)客戶群體，生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系,，以及高風(fēng)險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,，曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗證過的產(chǎn)品和技術(shù)，引入中國市場，開發(fā)、孵育和推廣,，致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國,，集中在為細胞/基因領(lǐng)域、/免疫,，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)染試劑,、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinic...

瞬時轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻...

Polysciences 是一家化學(xué)品制造公司，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域,。公司成立于1961年,，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域,。隨后,，開拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品，使組織除了石蠟包埋外,，還能夠包埋在塑料塊中,；開發(fā)染料和染色劑,，以實現(xiàn)更好的樣品觀測方式。與government合作,，開發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球,。與美國國家cancer中心合作，開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品,，并用于紫杉醇的初步臨床試驗,。抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,，包括從Research grade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì),，轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù)...

接種細胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的...

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物，分子量25000,，它能與核酸形成復(fù)合物,，并使該復(fù)合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細胞系,，如HEK-293,、HEK293T、HepG2,、Hela,、CHO-K1、COS-1,、COS-7,、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,，它仍然能的將核酸導(dǎo)入細胞,。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點：優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試,。將eGFP表達質(zhì)粒（GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01）用Endo...

Polysciences是一家化學(xué)品制造公司，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域,。公司成立于1961年,，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域,。隨后,，開拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品，使組織除了石蠟包埋外,，還能夠包埋在塑料塊中；開發(fā)染料和染色劑,，以實現(xiàn)更好的樣品觀測方式,。與government合作，開發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球,。與美國國家cancer中心合作,，開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗,。繼而開發(fā)出超順磁珠,，用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究,。Polysciences的高純度單體和聚合物產(chǎn)品在醫(yī)療器械中有許多應(yīng)用,，并不斷開發(fā)和增強其性能。近期業(yè)務(wù)擴展到...

1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲...