DMEM培養(yǎng)基的高糖與低糖有哪些區(qū)別,?用途不同:低糖DMEM用于養(yǎng)干細(xì)胞可防分化,,高糖DMEM可以養(yǎng)大多數(shù)哺乳動(dòng)物的細(xì)胞,。適用性不同:高糖DMEM適于培養(yǎng)代謝旺盛的細(xì)胞,而低糖適于培養(yǎng)一般代謝水平的細(xì)胞,。代謝活躍的細(xì)胞,如ES,,低糖培養(yǎng)基不能提供足夠的碳源,。性質(zhì)不同:低糖的酵母適合在7%以下的糖濃度中生存,而高糖的酵母適合在7%以上糖濃度中生存,。DMEM高糖培養(yǎng)基P04-04550含穩(wěn)定谷氨酰胺,,含25mMHepes,不含酸鈉,,廣泛應(yīng)用于支持哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的廣譜培養(yǎng)基,。相比于BME中增加了4倍的氨基酸和維生素含量。來源:用來培養(yǎng)未轉(zhuǎn)化過的老鼠和雞的細(xì)胞培養(yǎng),。有高糖(),、低糖(1g...
生物限度細(xì)胞培養(yǎng)基不是無菌產(chǎn)品,其中的微生物在一定條件下會(huì)吸收細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效,??刂萍?xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌,是延長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基有效期的方法之一,。清大天一在參考《中華人民共和國(guó)藥典》2005版二部附錄第100頁(yè)的口服給藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn),,并嚴(yán)于該標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的細(xì)菌數(shù)每1g不得超過200個(gè),,霉菌數(shù)每1g不得超過50個(gè),。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,,混勻即得試樣,。按中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進(jìn)行,檢查項(xiàng)目為細(xì)菌數(shù),、霉菌數(shù),。檢查法采用平皿法。這是一個(gè)性能特性表述的要求,。細(xì)胞培養(yǎng)基的功能就是培養(yǎng)哺...
2)優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)血清是非常復(fù)雜的混合物,,成分多樣,含有各種生理平衡的分子量差別很大的生物分子,,有的對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,,如含有攜帶、礦物質(zhì),、微量元素和脂類物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等,。血清能夠提供細(xì)胞貼壁因子和擴(kuò)散因子。血清中含有起穩(wěn)定作用和的因子,,能夠維持培養(yǎng)基的pH值并抑制蛋白酶直接或間接的酶解,。但是血清的加入也帶來了很多問題:(1)血清的成份可能有幾百種之多,目前對(duì)其準(zhǔn)確的成份,、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),,這給研究工作帶來許多困難,;(2)血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,,而且血清保存期至多一年,,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,,從...
四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌,。(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到徹底滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,蒸汽溫度就越高,。因此,,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),,殺菌效果好。使用產(chǎn)品時(shí)需注意以下事項(xiàng):1.使用前必須檢查大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基培養(yǎng)基,,...
2)優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)血清是非常復(fù)雜的混合物,,成分多樣,含有各種生理平衡的分子量差別很大的生物分子,,有的對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,,如含有攜帶、礦物質(zhì),、微量元素和脂類物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等,。血清能夠提供細(xì)胞貼壁因子和擴(kuò)散因子。血清中含有起穩(wěn)定作用和的因子,,能夠維持培養(yǎng)基的pH值并抑制蛋白酶直接或間接的酶解,。但是血清的加入也帶來了很多問題:(1)血清的成份可能有幾百種之多,目前對(duì)其準(zhǔn)確的成份,、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),,這給研究工作帶來許多困難,;(2)血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,,而且血清保存期至多一年,,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從...
一,、細(xì)胞培養(yǎng)基的概念和原理細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,,是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同,,英文都是medium,。當(dāng)它是粉劑時(shí),傾向性地稱為培養(yǎng)基,,而將粉劑配成液體后,,多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常常補(bǔ)加血清,、等成分,。培養(yǎng)基主要包括天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無血清細(xì)胞培養(yǎng)基等,。天然細(xì)胞培養(yǎng)基是人們?cè)缙诓捎玫募?xì)胞培養(yǎng)基,,直接取自于動(dòng)物組織提取液或體液,如血漿凝塊,、血清,、、胚胎浸出液等,。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,,但成分復(fù)雜,差異大,、不穩(wěn)定,,來源也受到限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養(yǎng)基,,富含氨基酸,。血清是天然培養(yǎng)基中有效和常用的培養(yǎng)基,但...
細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ),,它為動(dòng)物細(xì)胞的健康快速成長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),。所以只要用到細(xì)胞來制造生物技術(shù)產(chǎn)品,細(xì)胞培養(yǎng)基的重要作用就無可替代,。二,、細(xì)胞培養(yǎng)基的種類與基本成分組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿,、血清,、、雞胚浸出液等,。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期,,體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基,。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復(fù)雜、批間差異大,,因此逐漸被合成培養(yǎng)基所替代,。,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清,、馬血清等,。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因主要是來源充足、制備技術(shù)成熟,、經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理解,。牛血清分為小牛血清、新牛血清,、胎牛血清。小牛血清取自出生10~30天的小牛,;新牛血清取自出生24小...
一基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基是能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基,,有時(shí)用符號(hào)“[-]”來表示。野生型菌株是指從自然界分離得到的微生物在其發(fā)生突變前的原始菌株,。二,、完全培養(yǎng)基完全培養(yǎng)基是一種在基本培養(yǎng)基內(nèi)加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì),,即加入生長(zhǎng)因子而制成的各種營(yíng)養(yǎng)基,,可用來滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要,是微生物學(xué)上常用的一種培養(yǎng)基,,有時(shí)用符號(hào)“[+]”表示,。營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是指野生型菌株經(jīng)過人工誘變或者自然突變失去合成某種營(yíng)養(yǎng)(氨基酸,維生素,,核酸等)的能力,,只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子才能生長(zhǎng),成為營(yíng)養(yǎng)缺陷型,。[例]營(yíng)養(yǎng)缺陷型是一種生化突變株,,它...
、MEM,、RPMI-1640,、DMEM、DMEM/F12等,。主要成分是氨基酸,、維生素、碳水化合物,、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì),。人工合成培養(yǎng)基使用時(shí)還需添加一定量的血清使細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖:組成蛋白質(zhì)的基本單位,。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異,但幾種必需氨基酸細(xì)胞自身不能合成,,必須依靠培養(yǎng)液提供,,如組氨酸、異亮氨酸,、亮氨酸,、賴氨酸、蛋氨酸,、苯丙氨酸,、蘇氨酸、色氨酸,、纈氨酸,、半胱氨酸、酪氨酸等,。其余非必需氨基酸,,細(xì)胞可以自己合成,或通過轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來,。絕大部分細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,,因?yàn)楣劝滨0肥亲鳛槟茉醇疤荚次镔|(zhì)同時(shí)被細(xì)胞利用,是是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,,在缺少谷氨...
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基是供微生物,、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有培養(yǎng)基有碳水化合物,、含氮物質(zhì),、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有素和色素,。產(chǎn)品介紹:產(chǎn)品名稱:大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基運(yùn)送方式:快遞注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)基為低溫長(zhǎng)途運(yùn)輸,,收到后請(qǐng)先查看是否有漏液、破損或污染等,,若出現(xiàn)問題請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,。2.用75%的酒精擦拭瓶身,4℃保存,。注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)基為低溫長(zhǎng)途運(yùn)輸,,收到后請(qǐng)先查看是否有漏液、破損或污染等,,若出現(xiàn)問題請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,。2.用75%的酒精擦拭瓶身,4℃保庫(kù)存:現(xiàn)貨供應(yīng)(因產(chǎn)品數(shù)量會(huì)有變動(dòng),,詳細(xì)信息可電聯(lián)我...
儲(chǔ)存條件及保質(zhì)期】應(yīng)貯存在-10℃~-20℃,,避免反復(fù)凍融,;有效期為24個(gè)月?!静僮鞑襟E】貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):1.提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),。2.吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞。3.加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶。4.加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡。5.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔...
人膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基高校合作商3,、將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺(tái)內(nèi),。取出冷凍管,,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,,否則易發(fā)生污染,。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,,移入無菌操作臺(tái)內(nèi),。4、依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,,于無菌操作臺(tái)內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中,。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,,放入37°C,,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。人膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基高校合作商5,、大多數(shù)細(xì)胞而言,,1%以下之冷凍保護(hù)劑DM...
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,,一般都含有培養(yǎng)基有碳水化合物,、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,。有的培養(yǎng)基還含有素和色素,。產(chǎn)品介紹:產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基運(yùn)送方式:快遞注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)基為低溫長(zhǎng)途運(yùn)輸,收到后請(qǐng)先查看是否有漏液,、破損或污染等,,若出現(xiàn)問題請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。2.用75%的酒精擦拭瓶身,,4℃保存,。庫(kù)存:現(xiàn)貨供應(yīng)(因產(chǎn)品數(shù)量會(huì)有變動(dòng),詳細(xì)信息可電聯(lián)我司銷售人員)本產(chǎn)品供科研使用,,不適用于臨床,。小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基使用步驟:一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所...
細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境,,一般指完全培養(yǎng)液,添加了血清,、水解乳蛋白,、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。,,因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng),,如MEM培養(yǎng)基,較為常用的量為5%~10%的比例,,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,,細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。,,但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用,,以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸、小肽物質(zhì),。較為常用的方式是用漢氏(Hanks’BSS)或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般為5‰濃度),,即成乳漢(歐)液,,再與化學(xué)合成培養(yǎng)基(一般為MEM)按比例混合使用(如1:1)。(生長(zhǎng)因子等)模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)...
人膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基高校合作商3,、將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺(tái)內(nèi),。取出冷凍管,,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,,否則易發(fā)生污染,。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,,移入無菌操作臺(tái)內(nèi),。4、依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,,于無菌操作臺(tái)內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中,。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,,混合均勻,,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),。人膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基高校合作商5,、大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DM...
,,pH過高或者過低都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。pH值的測(cè)定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差,。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,,用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定,。按中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,,按中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行,,在空氣中放置水分會(huì)很快升燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示產(chǎn)品中含濕量。細(xì)胞培養(yǎng)基是有菌制劑,,其豐富的營(yíng)養(yǎng)成分有利于微生物生長(zhǎng),,控制細(xì)胞培養(yǎng)基中的水分可以防止微生物的繁殖,保持細(xì)胞培養(yǎng)基的養(yǎng)分,。按中華人民共和國(guó)藥典...