探針DNA克隆的篩選也可采用血清學(xué)方法,,所不同的是所建DNA文庫為可表達(dá)性,克隆菌落或噬斑經(jīng)裂解后釋放出表達(dá)抗原,然后用來源細(xì)菌的多克隆抗血清篩選陽性克隆,,所得到多個陽性克隆再經(jīng)其它細(xì)菌的抗血清篩選,,***只與本細(xì)菌抗血清反應(yīng)的表達(dá)克隆即含有此細(xì)菌的特異性基因片段,,它所編碼的蛋白是該菌種所特有的,。用這種表達(dá)文庫篩選得到的顯然只是特定基因探針,。對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑,。這也是許多重要蛋白質(zhì)的編碼基因的克隆方法,。該方法的第一步是分離純化蛋白質(zhì),然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列,,然后根據(jù)這一序列合成一套寡核苷酸探針,。這種偽隨機(jī)mac可避免無任何操作下WiFi探針對當(dāng)前環(huán)境的被...
電子探針儀鏡筒部分的構(gòu)造大體上和掃描電子顯微鏡相同,只是在檢測器部分使用的是X射線譜儀,、專門用來檢測X射線的特征波長或特征能量,,以此來對微區(qū)的化學(xué)成分進(jìn)行分析。因此,,除專門的電子探針儀外,,有相當(dāng)一部分電子探針儀是作為附件安裝在掃描電鏡或透射電鏡鏡筒上,以滿足微區(qū)組織形貌,、晶體結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分三位一體同位分析的需要 [1],。用波長色散譜儀(或能量色散譜儀)和檢測計數(shù)系統(tǒng),,測量特征X射線的波長(或能量)和強(qiáng)度,即可鑒別元素的種類和濃度,。電子探針和掃描電鏡在電子光學(xué)系統(tǒng)的構(gòu)造基本相同,,它們常常組合成單一的儀器。浦東新區(qū)優(yōu)勢探針售價是將探針卡上的探針直接與芯片上的焊墊或凸塊直接接觸,,引出芯片訊號,,再配合...
為了制備cDNA 探針,首先需分離純化相應(yīng)mRNA,,這從含有大量mRNA的組織,、細(xì)胞中比較容易做到,如從造血細(xì)胞中制備α或β珠蛋白mRNA,。有了mRNA作模板后,,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,就可以合成與之互補的DNA(即cDNA),,cDNA與待測基因的編碼區(qū)有完全相同的堿基順序,,但內(nèi)含子已在加工過程中切除。寡核苷酸探針是人工合成的,,與已知基因DNA互補的,,長度可從十幾到幾十個核苷酸的片段。如*知蛋白質(zhì)的氨基酸順序量,,也可以按氨基酸的密碼推導(dǎo)出核苷酸序列,,并用化學(xué)方法合成。電子探針的構(gòu)成除了與掃描電鏡結(jié)構(gòu)相似的主機(jī)系統(tǒng)以外,,還主要包括分光系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)等部分。浦東新區(qū)挑選探針五星服務(wù)電子探針可以對試樣中...
X射線譜儀能譜儀電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線,,不同的元素有不同的X射線特征波長和能量,。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀(波譜儀),,利用特征能量的就稱為能量色散譜儀(能譜儀)。1,、波譜儀波譜儀的關(guān)鍵在于怎樣實現(xiàn)將未知的特征譜線與已知元素Z聯(lián)系起來,?為此設(shè)想有一種晶面間距為d的特定晶體(我們稱為分光晶體),當(dāng)不同特征波長λ的X射線照射其上時,,如果滿足布拉格條件(2dsinθ=λ)將產(chǎn)生衍射,。顯然,對于任意一個給定的入射角θ*有一個確定的波長λ滿足衍射條件,。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)(鏡筒),,X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成,。徐匯...
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,現(xiàn)場調(diào)查及蟲種鑒定,,可用于病毒性肝炎的診斷,,遺傳性疾病的診斷,可用于檢測飲用水病毒含量,。具體方法:用一個特定的DNA片段制成探針,,與被測的病毒DNA雜交,從而把病毒檢測出來,。與傳統(tǒng)方法相比具有快速,、靈敏的特點。傳統(tǒng)的檢測一次,,需幾天或幾個星期的時間,,精確度不高,而用DNA探針只需一天,。據(jù)報道,,能從1t水中檢測出10個病毒來,精確度**提高,。RNA探針是一類很有前途的核酸探針,,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高,。分析范圍廣,。Z>4其中,波譜:Be~U,,能譜:Na~U,。松江區(qū)特制探針五星服務(wù)缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法,反應(yīng)體系的主要成分有D...
DNA探針是**常用的核酸探針,,指長度在幾百堿基對以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針?,F(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多,有細(xì)菌,、病毒,、原蟲、***,、動物和人類細(xì)胞DNA探針,。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列,。這些DNA片段須是特異的,,如細(xì)菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。以細(xì)菌為例,,分子雜交技術(shù)用于細(xì)菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準(zhǔn)確的多,,是細(xì)菌分類學(xué)的一個發(fā)展方向。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性,,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景,。由分光晶體所分散的單一波長X射線被X射線檢測器接受,常用的檢測器一般是正比計數(shù)器,。...
在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄,,有時還存在反向轉(zhuǎn)錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因,。另外,,在真核系統(tǒng),某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄,,產(chǎn)生反義RNA,,參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下,,要準(zhǔn)確測定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針,,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測的合適標(biāo)記物的分子,。利用核苷酸堿基順序互補的原理,,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補,,以檢測被測靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù),。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。能進(jìn)行微區(qū)分析,??煞治鰯?shù)個μm3內(nèi)元...
測試探針,K-50-QG 無線路由器測試,,是應(yīng)用于電子測試中測試PCBA的一種測試連接電子元件,。測試探針的種類有PCB探針、ICT功能測試探針(汽車線束測試探針,、電池針,、電流電壓針、開關(guān)針,、電容極性針,、高頻針)、BGA測試探針等,。測試探針根據(jù)產(chǎn)地不同又分為美國QA探針、美國ECT探針、美國IDI探針等,,德國INGUN探針,,德國PTR探針等,韓國LEENON探針,,中國臺灣CCP中國探針,,中國臺灣UC佑傳探針等。測試探針的質(zhì)量主要體現(xiàn)在材質(zhì),、鍍層,、彈簧、套管的直徑精度及制作工藝上,。測試探針分三種,,而國內(nèi)的產(chǎn)品其材質(zhì)很多用進(jìn)口材質(zhì)。 [1]原子序數(shù)12至22的元素要在真空下進(jìn)行成分測定,,原子序數(shù)12...
(3)X射線強(qiáng)度測量系統(tǒng),。特征X射線,由B系統(tǒng)中的計數(shù)管接收,,并轉(zhuǎn)換成電脈沖,,通過脈沖高度分析儀、計數(shù)率計,、定標(biāo)器,、電子電位計將其強(qiáng)度測量出來。(4)光學(xué)顯微鏡目測系統(tǒng),。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域,,并作光學(xué)觀察。(5)背散射電子圖像系統(tǒng),。(6)吸收電子圖像系統(tǒng),。(7)特征X射線圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線晶體光學(xué),,主要應(yīng)用兩種方法:1)晶體衍射法(X射線光譜法),。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度,來衍射某種波長的X射線,,通過讀出晶體不同的衍射角,,求出X射線的波長,從而定出樣品所含的元素,。這種神秘的Wi-Fi探針,實際是“WiFi信道掃描工具”,。浦東新區(qū)標(biāo)準(zhǔn)探針現(xiàn)價細(xì)菌的基因組大小約5×106b...
電子探針是運用電子所形成的探測針(細(xì)電子束)作為X射線的激發(fā)源來進(jìn)行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,,**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學(xué)成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12(Mg)至92(U),原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進(jìn)行測量,。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高,。此外,,后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相,、******照相,。能兼作透射電鏡、能進(jìn)行電子衍射,、能作電子熒光觀察等,。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。感量可達(dá)10-14至10-15g,。嘉定...
在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄,,有時還存在反向轉(zhuǎn)錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因,。另外,,在真核系統(tǒng),某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄,,產(chǎn)生反義RNA,,參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下,,要準(zhǔn)確測定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針,,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測的合適標(biāo)記物的分子,。利用核苷酸堿基順序互補的原理,,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補,,以檢測被測靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù),。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。不隨意安裝非正規(guī)商家應(yīng)用App,、及各...
2.界面探針(Interface Probes)非標(biāo)準(zhǔn)的探針,,一般是為少數(shù)做大型測試機(jī)臺的客戶定做的,例如泰瑞達(dá)(Teradyne)和安捷倫(Agilent).用于測試機(jī)臺與測試夾具的接觸點和面.3.微型探針(MicroSeries Probes)兩個測試點中心間距一般為0.25mm至0.76mm.4.開關(guān)探針(Switch Probes)開關(guān)探針單獨一支探針有兩路電流.5.高頻探針(Coaxial Probes)用于測試高頻信號,,有帶屏蔽圈的可測試10GHz以內(nèi)的和500MHz不帶屏蔽圈的.6.旋轉(zhuǎn)探針(Rotator Probes)彈力一般不高,,因為其穿透性本來就很強(qiáng),一般用于OSP處理過...
缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法,,反應(yīng)體系的主要成分有DNA酶I(DNase I),、大腸桿菌DNA聚合酶I(DNA polymerase I),、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標(biāo)記的核苷酸(如dATP,、dTTP,、dCTP,,”P—dGTP),,其原理如圖1。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機(jī)切開若干個缺口(不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓?,然后再借助于DNA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性,,切去5’末端的核苷酸;同時又利用該酶的5’→3’聚合酶活性,,使32P標(biāo)記的互補核苷酸補入缺口.DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用,,使缺口不斷向3’的方向移動,DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)...
特異性探針有三種形式——cDNA,、RNA,、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針,。RNA探針用途很廣,,也容易獲得,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途,。cDNA探針的獲得是,,將特定的基因片段裝載到質(zhì)粒或噬菌體中,,經(jīng)過擴(kuò)增,、酶切、純化等復(fù)雜的步驟,,才能得到一定長度的cDNA探針,。這一過程比較復(fù)雜,有相應(yīng)條件的實驗室才能做到,。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,,由核酸合成儀來完成,可廉價獲得大量的此類探針,。質(zhì)量也相對來說更為穩(wěn)定,。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基,所以有良好的信號放大作用,,但其滲透性比較差,。寡核苷酸探針一般為十?dāng)?shù)個至數(shù)十個堿基,滲透性強(qiáng),,但信號放大作用則較差,,合成的多相...
電子探針X射線顯微分析儀(簡稱電子探針)利用約1Pm的細(xì)焦電子束,,在樣品表層微區(qū)內(nèi)激發(fā)元素的特征X射線,根據(jù)特征X射線的波長和強(qiáng)度,,進(jìn)行微區(qū)化學(xué)成分定性或定量分析,。電子探針的光學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)等部分與掃描電鏡基本相同,,通常也配有二次電子和背散射電子信號檢測器,,同時兼有組織形貌和微區(qū)成分分析兩方面的功能。電子探針的構(gòu)成除了與掃描電鏡結(jié)構(gòu)相似的主機(jī)系統(tǒng)以外,,還主要包括分光系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)等部分。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)(鏡筒),,X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成,。電子探針和掃描電鏡在電子光學(xué)系統(tǒng)的構(gòu)造基本相同,它們常常組合成單一的儀器,。能進(jìn)行現(xiàn)場分析,。無需把分析對象從樣品中取出,可直接對大塊試樣中的...
安全**介紹,,WiFi探針盒子確實可以通過技術(shù)手段獲取個人信息,,用戶為避免信息泄露,可以在出門后關(guān)閉手機(jī)連接WiFi的功能,,并不要在一些不合規(guī)的APP上提供真實個人信息,。律師表示,利用探針盒子獲取他人手機(jī)號等隱私信息的行為涉嫌侵犯他人隱私,,可能面臨民事侵權(quán)責(zé)任及治安管理處罰責(zé)任,。實現(xiàn)原理1. WiFi信道掃描工具WiFi探針實現(xiàn)原理示意圖這種神秘的Wi-Fi探針,實際是“WiFi信道掃描工具”。市面上的WiFi有2.4G,、5G兩個頻段,每個頻段有不同的信道劃分,Wi-Fi探針設(shè)備通過在各個信道被動監(jiān)測,采集周圍的數(shù)據(jù)幀內(nèi)容,發(fā)現(xiàn)周邊手機(jī),、筆記本、路由器等無線設(shè)備,從而滿足客流統(tǒng)計,、精細(xì)營銷等需...
③末端標(biāo)記法(又叫尾標(biāo)),。利用末端轉(zhuǎn)移酶可進(jìn)行“尾標(biāo)”,尾標(biāo)適用于寡核苷酸探針標(biāo)記,,寡核苷酸探針多用于核酸“點”突變的檢測,,該探針可用核酸合成儀人工合成,克隆出的探針一般較長,,特異性好,,標(biāo)記量大,雜交的檢出信號強(qiáng),。探針合成的注意事項①合成探針的長短,,一般在20~50個核苷酸之間,。合成過長成本高,且易出現(xiàn)聚合酶合成錯誤,,雜交時間長,,合成太短則特異性下降。②堿基組成G-C應(yīng)含40%~60%,,一種堿基連續(xù)重復(fù)不超過4個,,以免非特異性雜交產(chǎn)生。③探針自身序列內(nèi)應(yīng)無互補區(qū)域,,以免產(chǎn)生“發(fā)夾”結(jié)構(gòu),,影響雜交??傊粋€好的探針**終要在實踐中才能加以確認(rèn),。為此,,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的...
2、能譜儀來自樣品的X光子通過鈹窗口進(jìn)入鋰漂移硅固態(tài)檢測器,。每個X光子能量被硅晶體吸收將在晶體內(nèi)產(chǎn)生電子空穴對,。不同能量的X光子將產(chǎn)生不同的電子空穴對數(shù)。例如,,F(xiàn)e的Kα輻射可產(chǎn)生1685個電子空穴對,,而Cu為2110。知道了電子空穴對數(shù)就可以求出相應(yīng)的電荷量以及在固定電容(1μμF)上的電壓脈沖,。多道脈沖高度分析器中的數(shù)模轉(zhuǎn)換器首先把脈沖信號轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號,,建立起電壓脈沖幅值與道址的對應(yīng)關(guān)系(道址號與X光子能量間存在對應(yīng)關(guān)系)。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀(波譜儀),,利用特征能量的就稱為能量色散譜儀(能譜儀),。普陀區(qū)挑選探針推薦貨源血凝素與生物素有非常高的親和性,當(dāng)血凝素標(biāo)記...
探針的標(biāo)記方式有放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記,。標(biāo)記物質(zhì)有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(zhì)(如生物素,、地高辛等)。32P是**常用的核苷酸標(biāo)記同位素,,被標(biāo)記的dNTP本身就帶有磷酸基團(tuán),,便于標(biāo)記。特點是比活性高,,可達(dá)9000Ci/mmol,;發(fā)射的β射線能量高。用它標(biāo)記的探針自顯影時間短,,靈敏度高,。32P的半壽期短,,雖使用不方便,但為廢棄物的處理減輕了壓力,。非放射性標(biāo)記法有酶標(biāo)法和化學(xué)物標(biāo)記法,。酶標(biāo)方法與免疫測定ELISA方法相似,只是被標(biāo)記的核酸代替了被標(biāo)記的抗體,,事實上被標(biāo)記的抗體也稱為探針,,現(xiàn)有許多商品是生物素、地高辛標(biāo)記的,。電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀,、X射線顯微分析儀。徐匯區(qū)優(yōu)勢探...
該系統(tǒng)為電子探針分析提供具有足夠高的入射能量,,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,,作為X射線的激發(fā)源。為此,,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的結(jié)構(gòu),。 為了提高X射線的信號強(qiáng)度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),,常用的加速電壓為10-30 KV,,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學(xué)顯微鏡,。它的作用是選擇和確定分析點,。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,,這是就能觀察到電子束轟擊點的位置,,通過樣品移動裝置把它調(diào)到光學(xué)顯微鏡目鏡十字線交叉點上,這樣就能保證電子束正好...
2.界面探針(Interface Probes)非標(biāo)準(zhǔn)的探針,,一般是為少數(shù)做大型測試機(jī)臺的客戶定做的,,例如泰瑞達(dá)(Teradyne)和安捷倫(Agilent).用于測試機(jī)臺與測試夾具的接觸點和面.3.微型探針(MicroSeries Probes)兩個測試點中心間距一般為0.25mm至0.76mm.4.開關(guān)探針(Switch Probes)開關(guān)探針單獨一支探針有兩路電流.5.高頻探針(Coaxial Probes)用于測試高頻信號,有帶屏蔽圈的可測試10GHz以內(nèi)的和500MHz不帶屏蔽圈的.6.旋轉(zhuǎn)探針(Rotator Probes)彈力一般不高,,因為其穿透性本來就很強(qiáng),,一般用于OSP處理過...
早期采用的RNA探針是細(xì)胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄或病毒復(fù)制過程中得到標(biāo)記的,,標(biāo)記效率往往不高,,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,,而不是用于檢測,。例如,在篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,,因無DNA探針可利用,,就利用HIV的全套標(biāo)記mRNA作為探針,,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進(jìn)行中的轉(zhuǎn)錄分析(nuclearrunontranscrip-tionassay)時,,在體外將細(xì)胞核分離出來,,然后在α-32P-ATP的存在下進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,所合成mR-NA均摻入同位素而得到標(biāo)記,,此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾...
血凝素與生物素有非常高的親和性,,當(dāng)血凝素標(biāo)記上過氧化物酶或堿性磷酸酶,經(jīng)雜交反應(yīng)**終形成探針-生物素-血凝素酶復(fù)合物(ABC法),,酶催化底物顯色,,觀察結(jié)果。ABC法底物顯色生成不溶物,,以便觀測結(jié)果,。酶標(biāo)記法復(fù)雜、重復(fù)性差,,成本高,,但便于運輸、保存,,靈敏度與放射物標(biāo)記法相當(dāng)。探針標(biāo)記方法①缺口平移標(biāo)記法,。利用的是DNA聚合酶I能修復(fù)DNA鏈的功能,。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機(jī)切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´端核苷酸,,同時在3´端修復(fù)加入被標(biāo)記核苷酸,,切口平行推移。缺口平移法快速,、簡便,、成本相對較低、比活性相對較高,、標(biāo)記均勻,,多用于大分子DNA標(biāo)記,(...
(1)電子光學(xué)系統(tǒng),。電子束直徑0.1~1μm,,電子束穿透深度1~3μm,。被激發(fā)原子發(fā)射特征X射線譜過程如下:圍繞原子核運動的內(nèi)層電子,被電子束的電子轟擊后,,其他外層電子為補充轟擊出的電子而發(fā)生躍遷,在躍遷過程中釋放出能量,,即發(fā)射出X射線,。(2)X射線譜儀,。測量各種元素產(chǎn)生的X射線波長和強(qiáng)度,并以此對微小體積中所含元素進(jìn)行定性和定量分析,。特征X射線圖像顯像管的原理是:X射線束入射到一已知晶面間距的晶體上(X射線分光光度計的彎曲晶體上),,經(jīng)衍射后各種波長的X射線按不同的布拉格角彼此分開,因此如轉(zhuǎn)動晶體,,改變衍射角,,同時以兩倍于晶體的轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)動計數(shù)器,就可以依次測量出各種元素所產(chǎn)生的X射線波長和強(qiáng)度,,...
為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交,,有必要對探針加以標(biāo)記,以便在結(jié)合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基,。但近年來已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng),、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染,。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation),。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探針DNA雙鏈上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNa poly merasⅠ)的5’→3’的外切酶活性,,切去帶有5’磷酸的核苷酸,;同時又利用該酶的5’→3’聚酶活性,使32P標(biāo)記的互補核...
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,,現(xiàn)場調(diào)查及蟲種鑒定,,可用于病毒性肝炎的診斷,遺傳性疾病的診斷,,可用于檢測飲用水病毒含量,。具體方法:用一個特定的DNA片段制成探針,與被測的病毒DNA雜交,,從而把病毒檢測出來,。與傳統(tǒng)方法相比具有快速、靈敏的特點,。傳統(tǒng)的檢測一次,,需幾天或幾個星期的時間,精確度不高,,而用DNA探針只需一天,。據(jù)報道,能從1t水中檢測出10個病毒來,,精確度**提高,。RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高,。1953年前蘇聯(lián)制成了X射線微區(qū)分析儀,,以后英、美等國陸續(xù)生產(chǎn),。青浦區(qū)質(zhì)量探針售價DNA探針是**常用的核酸探針,,指長度在幾百堿基對以...
這樣我們可以事先建立一系列θ角與相應(yīng)元素的對應(yīng)關(guān)系,當(dāng)某個由電子束激發(fā)的X特征射線照射到分光晶體上時,,我們可在與入射方向交成2θ角的相應(yīng)方向上接收到該波長的X射線信號,,同時也就測出了對應(yīng)的化學(xué)元素。只要令探測器連續(xù)進(jìn)行2θ角的掃描,,即可在整個元素范圍內(nèi)實現(xiàn)連續(xù)測量,。由分光晶體所分散的單一波長X射線被X射線檢測器接受,常用的檢測器一般是正比計數(shù)器,。當(dāng)某一X射線光子進(jìn)入計數(shù)管后,,管內(nèi)氣體電離,并在電場作用下產(chǎn)生電脈沖信號,。1953年前蘇聯(lián)制成了X射線微區(qū)分析儀,,以后英、美等國陸續(xù)生產(chǎn),。長寧區(qū)標(biāo)準(zhǔn)探針五星服務(wù)在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄,,有時還存在反向轉(zhuǎn)錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往...
電子探針是運用電子所形成的探測針(細(xì)電子束)作為X射線的激發(fā)源來進(jìn)行顯微X射線光譜分析的儀器,。分析對象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,**小范圍直徑為1μm,。電子探針可測量的化學(xué)成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12(Mg)至92(U),原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進(jìn)行測量,。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高,。此外,,后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相,、******照相,。能兼作透射電鏡、能進(jìn)行電子衍射,、能作電子熒光觀察等,。掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對試樣作點或微區(qū)分析,而且能對樣品...
特異性探針有三種形式——cDNA,、RNA,、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針,。RNA探針用途很廣,,也容易獲得,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途,。cDNA探針的獲得是,,將特定的基因片段裝載到質(zhì)粒或噬菌體中,,經(jīng)過擴(kuò)增,、酶切、純化等復(fù)雜的步驟,,才能得到一定長度的cDNA探針,。這一過程比較復(fù)雜,有相應(yīng)條件的實驗室才能做到,。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,,由核酸合成儀來完成,可廉價獲得大量的此類探針,。質(zhì)量也相對來說更為穩(wěn)定,。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基,所以有良好的信號放大作用,,但其滲透性比較差,。寡核苷酸探針一般為十?dāng)?shù)個至數(shù)十個堿基,滲透性強(qiáng),,但信號放大作用則較差,,合成的多相...
探針的標(biāo)記方式有放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。標(biāo)記物質(zhì)有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(zhì)(如生物素,、地高辛等),。32P是**常用的核苷酸標(biāo)記同位素,被標(biāo)記的dNTP本身就帶有磷酸基團(tuán),,便于標(biāo)記,。特點是比活性高,可達(dá)9000Ci/mmol,;發(fā)射的β射線能量高,。用它標(biāo)記的探針自顯影時間短,靈敏度高,。32P的半壽期短,,雖使用不方便,,但為廢棄物的處理減輕了壓力。非放射性標(biāo)記法有酶標(biāo)法和化學(xué)物標(biāo)記法,。酶標(biāo)方法與免疫測定ELISA方法相似,,只是被標(biāo)記的核酸代替了被標(biāo)記的抗體,事實上被標(biāo)記的抗體也稱為探針,,現(xiàn)有許多商品是生物素,、地高辛標(biāo)記的。電子探針是法國制成的,,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組...