免疫沉淀（Immunoprecipitation,，IP）是一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的技術(shù),，主要用于從復(fù)雜混合物中分離和富集特定的目標(biāo)蛋白或多肽。該技術(shù)基于抗原與抗體之間的特異性結(jié)合,，通過抗體與目標(biāo)蛋白的結(jié)合,，再利用固相載體（如瓊脂糖珠或磁珠）將抗原-抗體復(fù)合物從溶液中分離出來,。免疫沉淀技術(shù)不僅可用于蛋白質(zhì)的純化，還可用于研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,、蛋白質(zhì)翻譯后修飾以及蛋白質(zhì)功能分析等領(lǐng)域,。免疫沉淀的基本步驟包括樣品制備、抗體孵育,、復(fù)合物捕獲和洗脫,。免疫沉淀操作中，合適抗體的選擇是決定能否成功捕獲目標(biāo)抗原的重要前提,。南京Protein AG免疫沉淀實(shí)驗(yàn)原理

之后加入 Protein A/G 珠子,，再次孵育，使抗原 - 抗體復(fù)合物與珠子結(jié)合,。通過離心或磁力分離,，將結(jié)合有蛋白質(zhì)復(fù)合物的珠子收集起來，隨后進(jìn)行多次洗滌,，去除未結(jié)合的雜質(zhì),。洗滌過程中，洗滌液的成分和洗滌次數(shù)同樣影響著實(shí)驗(yàn)結(jié)果的純度和特異性,。,，使用洗脫液將蛋白質(zhì)復(fù)合物從珠子上洗脫下來，用于后續(xù)的分析。Co-IP 免疫沉淀在生命科學(xué)研究的多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用,。在信號(hào)傳導(dǎo)通路研究中,，通過 Co-IP 免疫沉淀可以鑒定出參與同一信號(hào)通路的蛋白質(zhì)，明確它們之間的上下游關(guān)系,，從而構(gòu)建完整的信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò),。上海anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠的選擇利用 Protein A/G 免疫沉淀，可深入探究蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的功能與相互作用,。

例如在研究腫瘤細(xì)胞的增殖信號(hào)通路時(shí),，科研人員可以以某個(gè)關(guān)鍵的信號(hào)蛋白為誘餌，利用 Co-IP 免疫沉淀找出與之相互作用的其他蛋白,，揭示腫瘤細(xì)胞異常增殖的分子機(jī)制,。在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域，Co-IP 免疫沉淀可用于研究神經(jīng)元中蛋白質(zhì)的相互作用,，了解神經(jīng)遞質(zhì)釋放,、突觸可塑性等過程的分子基礎(chǔ)。雖然 Co-IP 免疫沉淀技術(shù)有著諸多優(yōu)勢,，如能夠在接近生理?xiàng)l件下研究蛋白質(zhì)相互作用,，結(jié)果更具生理相關(guān)性；可以同時(shí)檢測多個(gè)蛋白質(zhì)之間的相互作用,，有助于發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)復(fù)合物,。

我們向裂解液中加入針對某個(gè)已知蛋白（誘餌蛋白）的特異性抗體，抗體與誘餌蛋白結(jié)合形成抗原 - 抗體復(fù)合物,。如同 IP 免疫沉淀一樣,，借助 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠等固相載體，將抗原 - 抗體復(fù)合物從復(fù)雜的裂解液中分離出來,。此時(shí),，與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白質(zhì)（獵物蛋白）也會(huì)隨著誘餌蛋白一起被沉淀下來，從而實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)復(fù)合物的富集和分析,，幫助我們了解細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系,。實(shí)驗(yàn)流程上，首先同樣是細(xì)胞或組織的裂解,。免疫共沉淀（Co-IP）是研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,，揭示分子網(wǎng)絡(luò)。

免疫沉淀技術(shù)自誕生以來,，便在生命科學(xué)研究領(lǐng)域扮演著舉足輕重的角色,。早期的免疫沉淀技術(shù)較為簡單，主要依賴于抗原抗體的基本結(jié)合原理,。隨著研究的深入,，科研人員不斷優(yōu)化,，使得這一技術(shù)逐漸成熟。如今,，它已成為研究生物分子相互作用的重要手段,。免疫沉淀的原理基于抗原與抗體的特異性識(shí)別。在復(fù)雜的生物樣本中,，抗體如同 “精確制導(dǎo)武器”,，能靶向結(jié)合目標(biāo)抗原，形成穩(wěn)定的抗原 - 抗體復(fù)合物,。再利用固相載體的特性,，將復(fù)合物從樣本中分離出來，從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)分子的富集與分析,。免疫沉淀搭配其他技術(shù),，如 western blot，可對目標(biāo)蛋白定性定量,，豐富研究維度。杭州免疫沉淀磁珠多少錢

通過免疫共沉淀（Co-IP）,，可以研究蛋白質(zhì)之間的相互作用網(wǎng)絡(luò),。南京Protein AG免疫沉淀實(shí)驗(yàn)原理

免疫沉淀技術(shù)的成功關(guān)鍵在于抗體的選擇和質(zhì)量。高特異性和高親和力的抗體能夠顯著提高目標(biāo)蛋白的富集效率,，并減少非特異性結(jié)合的干擾,。此外，實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化（如緩沖液成分,、孵育時(shí)間和溫度）也對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有重要影響,。為了確保實(shí)驗(yàn)的可靠性，通常會(huì)設(shè)置陰性對照（如使用非特異性抗體）以排除非特異性結(jié)合的干擾,。免疫沉淀技術(shù)的應(yīng)用非常,。例如，在蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究中,，免疫沉淀可以與質(zhì)譜聯(lián)用（Co-IP/MS）來鑒定與目標(biāo)蛋白相互作用的蛋白網(wǎng)絡(luò),。南京Protein AG免疫沉淀實(shí)驗(yàn)原理