免疫沉淀,,作為生物研究領(lǐng)域的重要技術(shù)之一,,宛如一把精密的鑰匙,精細(xì)開啟探索生物分子復(fù)雜世界的大門,。這項(xiàng)技術(shù)的重要原理,,是巧妙利用抗原與抗體之間如同“命中注定”般的特異性結(jié)合。就像在茫茫人海中,,每個(gè)人都有獨(dú)特的“另一半”,,抗原與抗體一旦相遇,便迅速且緊密地結(jié)合在一起,,形成穩(wěn)定的抗原-抗體復(fù)合物,。操作過程有條不紊且充滿科學(xué)智慧。先將待研究的生物樣本,,比如細(xì)胞提取物準(zhǔn)備妥當(dāng),,這就如同搭建起一個(gè)“分子舞臺(tái)”。蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,,免疫沉淀可有效分離出與目標(biāo)蛋白相互作用的其他蛋白,助力機(jī)制探索,。上海IP免疫沉淀磁珠現(xiàn)貨
我們向裂解液中加入針對(duì)某個(gè)已知蛋白(誘餌蛋白)的特異性抗體,,抗體與誘餌蛋白結(jié)合形成抗原 - 抗體復(fù)合物。如同 IP 免疫沉淀一樣,,借助 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠等固相載體,,將抗原 - 抗體復(fù)合物從復(fù)雜的裂解液中分離出來。此時(shí),,與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白質(zhì)(獵物蛋白)也會(huì)隨著誘餌蛋白一起被沉淀下來,,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)復(fù)合物的富集和分析,幫助我們了解細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系,。實(shí)驗(yàn)流程上,,首先同樣是細(xì)胞或組織的裂解。北京Protein AG免疫沉淀技術(shù)服務(wù)免疫沉淀技術(shù)革新,,新型磁珠,、高親和力抗體涌現(xiàn),大幅提升沉淀效率與特異性,。
免疫沉淀(Immunoprecipitation,,IP)是一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的技術(shù),,主要用于從復(fù)雜混合物中分離和富集特定的目標(biāo)蛋白或多肽。該技術(shù)基于抗原與抗體之間的特異性結(jié)合,,通過抗體與目標(biāo)蛋白的結(jié)合,,再利用固相載體(如瓊脂糖珠或磁珠)將抗原-抗體復(fù)合物從溶液中分離出來。免疫沉淀技術(shù)不僅可用于蛋白質(zhì)的純化,,還可用于研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,、蛋白質(zhì)翻譯后修飾以及蛋白質(zhì)功能分析等領(lǐng)域。免疫沉淀的基本步驟包括樣品制備,、抗體孵育,、復(fù)合物捕獲和洗脫。
例如,,在研究細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路時(shí),,通過免疫沉淀技術(shù)可以找出參與信號(hào)傳遞的蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系,為理解細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制提供關(guān)鍵線索,。在蛋白質(zhì)翻譯后修飾研究方面,,免疫沉淀可以富集經(jīng)過特定修飾(如磷酸化、乙?;龋┑牡鞍踪|(zhì),,進(jìn)而深入研究這些修飾對(duì)蛋白質(zhì)功能的影響。在病毒學(xué)研究中,,免疫沉淀可用于分離病毒蛋白及其與宿主細(xì)胞蛋白形成的復(fù)合物,,有助于了解病毒機(jī)制以及宿主的免疫應(yīng)答過程。免疫沉淀技術(shù)具有諸多優(yōu)勢(shì),。它能夠在復(fù)雜的生物樣品中特異性地富集目標(biāo)分子,,顯著提高目標(biāo)分子的濃度,便于后續(xù)的檢測(cè)和分析,。同時(shí),,該技術(shù)可以保留生物分子之間的天然相互作用關(guān)系,為研究分子間的生理功能提供了接近真實(shí)生理狀態(tài)的樣本,。通過免疫沉淀,,可從復(fù)雜樣本中富集特定蛋白,為功能研究和疾病診斷提供支持,。
之后加入固相載體,,使其與抗體結(jié)合,形成穩(wěn)固的免疫復(fù)合物,。通過離心,,將免疫復(fù)合物沉淀到離心管底部,去除上清液,,此時(shí)沉淀中就富集了目標(biāo)抗原及與之相互作用的分子,。為了提高純度,,還需對(duì)沉淀進(jìn)行多次洗滌,去除非特異性結(jié)合的雜質(zhì),。,,使用洗脫緩沖液將目標(biāo)抗原從免疫復(fù)合物中洗脫下來,得到可供后續(xù)分析的樣品,。免疫沉淀技術(shù)在多個(gè)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,。在蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究中,它能夠幫助科研人員鑒定與目標(biāo)蛋白質(zhì)相互作用的其他蛋白質(zhì),,從而揭示蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成和功能,。采用 anti DYKDDDDK 免疫沉淀,可深入探究 DYKDDDDK 標(biāo)簽蛋白的相互作用網(wǎng)絡(luò),。ChIP免疫沉淀磁珠現(xiàn)貨
免疫沉淀廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)組學(xué),,幫助解析蛋白質(zhì)功能、相互作用及修飾機(jī)制,。上海IP免疫沉淀磁珠現(xiàn)貨
在研究蛋白質(zhì)功能時(shí),,科研人員可以通過 IP 免疫沉淀獲得目標(biāo)蛋白,進(jìn)一步研究其在細(xì)胞內(nèi)的定位,、活性以及與其他分子的相互作用,;在分析蛋白質(zhì)翻譯后修飾時(shí),如磷酸化,、乙?;龋琁P 免疫沉淀能夠富集修飾后的蛋白質(zhì),,便于深入研究修飾對(duì)蛋白質(zhì)功能的影響,;在疾病機(jī)制探索中,通過對(duì)疾病相關(guān)蛋白進(jìn)行 IP 免疫沉淀分析,,有助于發(fā)現(xiàn)潛在的疾病標(biāo)志物和靶點(diǎn)。隨著生命科學(xué)的飛速發(fā)展,,IP 免疫沉淀技術(shù)也在不斷革新,。未來,它將與新興技術(shù)如單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué),、空間蛋白質(zhì)組學(xué)等深度融合,,為蛋白質(zhì)研究提供更加、精細(xì)的信息,,助力科研人員在生命科學(xué)的探索道路上不斷前行,,為解決人類健康問題和推動(dòng)生物科學(xué)發(fā)展做出更大貢獻(xiàn)。上海IP免疫沉淀磁珠現(xiàn)貨