鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。目前,，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中,，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2],，由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白,，其臨床療效遠遠低于自體骨組織。但是,，自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織,，數(shù)量有限，難以滿足臨床需要,。因此,，研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料，成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標,。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,，在分子結(jié)構(gòu)上，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,，沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長[3],。本研究仿生天然骨組織的分子結(jié)構(gòu)，酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白,，重構(gòu)形成Ⅰ型膠原纖維,，然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內(nèi)骨生物礦化，通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內(nèi)部的骨生物礦化,。膠原蛋白是一種蛋白質(zhì),，能幫助連接皮膚，骨頭和肌腱等身體組織,。合肥石家莊鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,，pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,，在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和,。需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預(yù)冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：將200ul生友鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入 690ul H2O,。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入100ul 10xPBS或10x培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要用pH試紙測試),。無錫鼠尾膠原哪家便宜利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，其特征在于,，包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,，真空冷凍干燥備用,； (2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目； (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,，期間不斷攪拌，防止凍結(jié)成塊,，得到膠原溶脹液,； (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中，鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50: I?100: 1，在4°C,，48?74小時酶解,，期間間歇性攪拌。

鼠尾膠原的提取步驟：配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液（用鹽酸將其PH值調(diào)至7.5） 取鼠尾,，去皮,，由尖部向前分段抽取肌腱，置于生理鹽水中,，稱重,，再倒掉生理鹽水，酒精中浸泡20分鐘 離心膠原溶液,，（1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液離心,，（8000rpm 5min) 其上清，留絮狀沉 10.將絮狀沉淀物置于三蒸水中,，用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮狀沉淀物,，加入消毒過的攪拌 子，冷房攪拌數(shù)天,，得絮狀膠原,。 注意所有和膠原有關(guān)的操作都在冰上進行\(zhòng) Rat tail collagen type 配置含4.5mmol/L NaCl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-HCl 溶液（用鹽酸將其pH值調(diào)至7.5）； 于-20冰箱中取出鼠尾,，浸泡75%或70%酒精,，解凍； 在一小培養(yǎng)皿中放置少量生理鹽水,，置于電子秤上,，調(diào)零； 取鼠尾,，去皮,，由尖部向前分段抽取肌腱，置于生理鹽水中,。注意事項：在室溫下pH 中性時可迅速成膠,，在操作過程中要 盡量保持低溫。

鼠尾膠原蛋白等實驗技術(shù)應(yīng)用：干細胞,、血管內(nèi)皮細胞等多種「難伺候」的細胞,，以及一些組織在體外培養(yǎng)時，需要在模擬體內(nèi)環(huán)境的細胞外基質(zhì)中生長,，膠原蛋白和纖粘蛋白正是細胞外基質(zhì)的主要組成部分,，富含 1 型膠原蛋白大鼠尾部也成了實驗室用膠原蛋白的較主要來源。鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴,、在小鼠尾靜脈上劃一道小口,、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的,。它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化，確認小鼠是否患上了 糖尿病或者某些治好能夠改變小鼠的血糖等,。比起心臟和眼部取血,，實驗用鼠尾尖取血的取血量較小，但取血之后,，小鼠還能繼續(xù)下一步建?；蛘邔嶒灒耆珱]有性命之憂,。鼠尾膠原醋酸溶解：在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。杭州正規(guī)鼠尾膠原

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基，它具有促進體外培養(yǎng)細胞（特別是上皮細胞）貼壁的作用,。合肥石家莊鼠尾膠原

如何補充膠原蛋白我們都知道膠原蛋白本身是大分子,，不能被我們的腸胃直接吸收，而是會被分解轉(zhuǎn)化為氨基酸,，相當于吃進去了普通的蛋白質(zhì),。只有具備生物活性的小分子膠原蛋白，才能直接滲進小腸黏膜細胞,，補充到全身肌膚中,。所以，想要吃進去的膠原蛋白能夠有美膚**的效果,，首先要挑對膠原蛋白,。1、口服含膠原蛋白的食物骨肉湯,、口服膠原蛋白補品等都屬于膠原蛋白食物,。但由于會被人的消化系統(tǒng)過濾掉很大一部分,，且真正能到達肌膚并起到作用的量非常有限2.直接皮下注射主要用于填充深的皺紋,，皮膚損傷造成的缺損（如青春痘疤）和修補臉形的缺陷等。其效果立竿見影,，但注射到皮膚內(nèi)的膠原蛋白會被人體逐漸吸收,，因此其功效只能維持半年至一年，而且少數(shù)人群可能會出現(xiàn)過敏,、傳染等副作用,。合肥石家莊鼠尾膠原