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鼠尾膠原蛋白等實驗技術應用:干細胞,、血管內皮細胞等多種「難伺候」的細胞,,以及一些組織在體外培養(yǎng)時,需要在模擬體內環(huán)境的細胞外基質中生長,,膠原蛋白和纖粘蛋白正是細胞外基質的主要組成部分,,富含1型膠原蛋白大鼠尾部也成了實驗室用膠原蛋白的較主要來源。鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴,、在小鼠尾靜脈上劃一道小口,、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的。它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化,,確認小鼠是否患上了糖尿病或者某些治好能夠改變小鼠的血糖等,。比起心臟和眼部取血,實驗用鼠尾尖取血的取血量較小,,但取血之后,小鼠還能繼續(xù)下一步建?;蛘邔嶒?,完全沒有性命之憂。制備鼠尾膠原:離心,,4000轉/分,,10-15分鐘。無錫正規(guī)鼠尾膠原廠家現貨
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結合的工藝,,保持恒低溫無菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,,簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,,進行多次真空冷凍干燥,,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌,、無菌包裝,,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,,提高了產率和生物相容性,,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料,。廣州正規(guī)鼠尾膠原哪家便宜鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗長時程的記錄。
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現代醫(yī)學的發(fā)展,,各種醫(yī)用耗材的更新換代也是日新月異,。止血材料是常見的醫(yī)療器械產品。但是現今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點,;同時還存在著容易與傷口粘附不易去除,,導致傷口潰爛,或者因為粘附導致傳染,;再次就是止血材料多是通過吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質的材料來生產的。現今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素,、α-氰基丙烯酸酯類組織膠,、醫(yī)用止血明膠等,但是都有各自的缺點,。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高,;α-氰基丙烯酸酯類組織膠降解過程中釋放出氰和甲醛等有毒物質;醫(yī)用止血明膠黏附性較差,,易脫落,,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等。
鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I,、無菌10×PBS,、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH,。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積,。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4)在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL),。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質并放入冰中,。4.6加入膠原蛋白I并計算體積,,混勻,,冰上備用。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時,。6)使用時,,無菌條件下將溶液加入到細胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min。按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜,。
要準備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,,無齒鑷1把,,200ml燒杯1個,培養(yǎng)皿1個,,帶蓋廣口瓶1個,,離心管、小瓶數個,,滴管若干,。以上物品須經嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液,。經44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,,洗凈,,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,,用止血鉗夾住尾巴較高,,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,,稱尾腱的重量,,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置48小時,,離心,。吸取其上清,分裝至小瓶,,4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成。制備鼠尾膠原:重復步驟2,、3,,直至尾腱量夠用,。徐州正規(guī)鼠尾膠原廠家現貨
鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。無錫正規(guī)鼠尾膠原廠家現貨
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,,它具有促進體外培養(yǎng)細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,,同時它也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內放置小玻片,,制備細胞爬片時,,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。通過本實驗可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,,并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶內,。實驗設備及材料:大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實驗內容:1,、制備鼠尾膠原。2,、切割小玻片,。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內,。無錫正規(guī)鼠尾膠原廠家現貨