RNA提取注意事項(xiàng):所有實(shí)驗(yàn)所用的泵頭,、離心管等消耗品均要使用RNase-free的,;整個(gè)過(guò)程要在無(wú)RNase污染的條件下進(jìn)行,,通??梢栽跓o(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并用75%的酒精進(jìn)行擦拭殺菌,,如有必要也可在實(shí)驗(yàn)前噴灑一些商用的RNase壓制劑,;所有相關(guān)溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用無(wú)水乙醇與DEPC水配制);溶液的配制使用移液器進(jìn)行操作,,切勿使用量筒等中間器皿,;研缽、研棒,、鑷子,、剪刀等用錫箔紙包好后,200℃干熱滅菌4h,;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一定要戴手套和口罩,;異丙醇、氯仿,、乙醇等試劑要使用未開(kāi)封的,,或者開(kāi)封之后直接分裝至小容量離心管的,以避免多次使用的交叉污染,;RNA提取試劑注意事項(xiàng):需自備氯仿,,異丙醇,DEPC,,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水,。徐州正規(guī)RNA提取試劑單價(jià)
如果把一個(gè)細(xì)胞比作一個(gè)城市,,那么DNA就像是一個(gè)管理人員,,它坐在細(xì)胞核內(nèi),監(jiān)視著“細(xì)胞城”的一舉一動(dòng),,像哪里細(xì)胞膜破了需要修補(bǔ),,什么時(shí)候需要合成蛋白質(zhì),顯而易見(jiàn),,光靠我們DNA管理人員一個(gè)人自然忙不過(guò)來(lái)啦,,于是我們的DNA管理人員決定給自己找一些“打工仔”,它們就是RNA,,但是近年來(lái)越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn),,這些RNA似乎遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止一個(gè)普通默默無(wú)聞的“公務(wù)員”那樣簡(jiǎn)單,它們?cè)诨虮磉_(dá)中發(fā)揮著不亞于DNA的巨大的作用,,如2006年諾貝爾獎(jiǎng)生理/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)就頒發(fā)給了RNA干擾的兩位發(fā)現(xiàn)者,。RNA干擾現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)為遺傳研究提供了一種強(qiáng)大的研究手段,這也說(shuō)明這些對(duì)RNA的研究有著巨大的前景.而作為南大較好科研接班人的我們自然也不能甘于人后,,于是我們決定從酵母RNA的提取開(kāi)始做起,。蘇州RNA提取試劑平均價(jià)格植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有CS過(guò)濾柱,可有效去除其它雜質(zhì),。
目前,,主流的RNA提取方法有Trizol法、離心柱法和磁珠法,。其中,,Trizol法與離心柱法相比,提取效果相當(dāng),,但因其對(duì)操作者帶來(lái)的毒性,,現(xiàn)在越來(lái)越被棄用。磁珠法可以針對(duì)大批量樣本處理,,適合機(jī)器自動(dòng)化提取,,但是提取核酸純度低,提取得率低,,且使用成本較高,。對(duì)于拭子RNA含量較低的樣本或比較珍貴的樣本或樣本總數(shù)不是很多的實(shí)驗(yàn)室,選擇的拭子RNA提取方法應(yīng)是離心柱法,。近來(lái),,隨著基因診斷技術(shù)的發(fā)展,從口腔拭子,、泌尿生殖道拭子,、痰液等樣本中進(jìn)行RNA提取的試劑盒的應(yīng)用價(jià)值越來(lái)越大,如tumour早期診斷,、遺傳病檢測(cè)和病原體傳染核酸檢測(cè)等,。拭子RNA提取效果在很大程度上取決于采樣質(zhì)量,、試劑盒性能等,特別是試劑盒的性能較大影響了拭子核酸的基因檢測(cè)和各種研究的開(kāi)展,。
RNA指的是核糖核酸,。真核生物體的遺傳物質(zhì)存在于細(xì)胞核內(nèi),多數(shù)的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來(lái)作為遺傳的中心物質(zhì),,但是少量的病菌遺傳物質(zhì)可以是RNA,。正因?yàn)椴【倪z傳物質(zhì)是RNA,所以可以通過(guò)檢測(cè)病菌的RNA是否存在,,或者其濃度和含量來(lái)判斷是否存在相應(yīng)的病菌傳染,,傳染的程度及病菌是否仍在大量復(fù)制。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,,核糖和堿基構(gòu)成,。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤,、G鳥(niǎo)嘌呤,、C胞嘧啶、U尿嘧啶,,其中,,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的縮寫,。存在于生物細(xì)胞以及部分病菌,、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長(zhǎng)鏈狀分子,。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,,同時(shí)使污染物通過(guò)柱被有效地洗去。RNA提取試劑注意事項(xiàng):有機(jī)相用異丙醇沉淀可回收蛋白,。
糞便總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸,、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,。克服了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強(qiáng),,適用于各種不同的土壤,、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟,。快速,,簡(jiǎn)捷,,單個(gè)樣品操作一般可在1小時(shí)內(nèi)完成。多次柱漂洗確保高純度,,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9以上,,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應(yīng),。細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):試劑盒可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或者組織樣品的提取,。南昌RNA提取試劑生產(chǎn)廠家
拭子RNA提取試劑的選擇?應(yīng)有較高的提取得率,。徐州正規(guī)RNA提取試劑單價(jià)
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對(duì)血清,、血漿樣本中miRNA提取而開(kāi)發(fā)的,利用吸附柱法從血清,、血漿樣品中簡(jiǎn)單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA,。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料,,對(duì)RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力,,與常用的抗凝劑(包括肝素、EDTA,、檸檬酸鈉,、草酸鈉)兼容,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作,。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,可以從普通植物的根、莖,、葉中快速提取總RNA,,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過(guò)程,提取的總RNA純度高,,沒(méi)有DNA和蛋白質(zhì)的污染,,適用于RT-PCR、qRT-PCR,、芯片分析,、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)。總RNA吸附柱保證RNA提取速度快,,提取效率高,。高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質(zhì),,提取RNA的純度高,,產(chǎn)量大徐州正規(guī)RNA提取試劑單價(jià)