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來源: 發(fā)布時間:2022-06-09

植物RNA提取:植物組織中,,富含酚類化合物,,或富含多糖,,或含有某些尚無法確定的次級代謝產(chǎn)物,或RNase的活性較高,。這些物質(zhì)在細胞裂解后與RNA緊密結(jié)合形成難溶復(fù)合物或者膠狀沉淀,,很難將其去除。所以我們在提取植物組織時,,要選取針對植物的試劑盒,,試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化、多糖化合物與核酸分離等難題,。1,、植物的果皮、果肉,、種子,、葉片等要在研缽中充分研磨,研磨過程中液氮要及時補充,,避免樣品融化,,研磨后的樣品應(yīng)迅速加入裂解液中震蕩混勻,避免RNA降解,。2,、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本,則應(yīng)適當(dāng)減少提取用量,,否則組織研磨及裂解不徹底,,會使提取的RNA產(chǎn)量較低。3,、含水分較多的植物組織例如石榴果實,、西瓜果實、桃子果實等則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量(可選100~200mg),。4,、植物組織,如植物葉片,、根莖,、堅硬的果實等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份,再繼續(xù)進行提取步驟,。常規(guī)的組織勻漿機對植物組織的勻漿效果可能不佳,,一般不建議使用。RNA提取試劑注意事項:有機相用異丙醇沉淀可回收蛋白,。上海RNA提取試劑哪里買

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總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑,。實驗操作快速方便,顏色鮮明,,便于分層,。本試劑適用范圍普遍,,可以從動物組織、植物材料,、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總RNA,。該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性,。在加入氯仿離心后,,溶液會分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機相,,RNA分布在上清層中。收集上清層后,,經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA,。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,,可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實驗,,如RT-PCR、Real-timeRT-PCR,、Northernblot,、DotBlot、體外翻譯等,。唐山正規(guī)RNA提取試劑廠家供應(yīng)RNA提取試劑注意事項:使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些,。

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將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,,室溫放置1~2分鐘,。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,,可以立即使用或存放于-80℃待用,。昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,,棄穿透液,。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,,棄穿透液,。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,,棄穿透液,。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,,棄穿透液,。此步可以省略,。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用,。

血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,,利用吸附柱法從血清,、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果,。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料,,對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力,與常用的抗凝劑(包括肝素,、EDTA,、檸檬酸鈉、草酸鈉)兼容,,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實驗操作,。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,可以從普通植物的根,、莖,、葉中快速提取總RNA,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染,適用于RT-PCR,、qRT-PCR,、芯片分析、Northernblot雜交等實驗,??俁NA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高,。高效去除植物組織中的色素,、酚類等雜質(zhì),提取RNA的純度高,,產(chǎn)量大,。RNA提取試劑注意事項:需自備氯仿,異丙醇,,DEPC,,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。

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植物RNA提取過程:植物組織成分相對于動物組織來說復(fù)雜多樣,,因此其RNA的分離和純化的難度也隨之加大,,如果要完美的數(shù)據(jù)結(jié)果,那么提取純度高,、完整性好的RNA就成了關(guān)鍵所在,。植物RNA的提取一般會經(jīng)歷以下幾個過程:1.破碎細胞壁。2.裂解細胞膜,。3.雜質(zhì)去除,,包括:DNA、蛋白質(zhì),、多糖,、多酚、次生代謝產(chǎn)物等,。4.純化和濃縮RNA,。而在RNA提取過程中,純化除雜的過程是影響RNA純度的關(guān)鍵所在,。在完整的細胞內(nèi),多糖多酚類化合物,,次級代謝產(chǎn)物,,蛋白質(zhì)如RNase等與核酸是分離的,一旦細胞破碎,,這些物質(zhì)就不可避免的會與RNA發(fā)生相互作用,。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料。珠海正規(guī)RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

植物花總RNA提取試劑盒:效去除植物花組織中的多糖,、多酚類等雜質(zhì),。上海RNA提取試劑哪里買

酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介,。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二,、試劑盒特點:1,、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2,、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題,。3、獨有的RL裂解液配方,,可以有效的消除基因組污染,。4、多次漂洗去蛋白過程,,提取RNA純度更高,。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,,提高了純度~上海RNA提取試劑哪里買