細(xì)胞冷凍的原理:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力,。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷,。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,,這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購(gòu)買,、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),,可使溶液冰點(diǎn)降低,,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,,減少了冰晶形成,,從而避免細(xì)胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活,。無血清凍存液用途:無血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件:置于2~8℃避光保存,,有效期為1年。金華無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無血清細(xì)胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。1)按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中,。2)按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml),。3)取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,,3~5min)。移去離心管中的上清液,。4)加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,,制成細(xì)胞混合液,。5)將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6)直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,,長(zhǎng)期冷凍保存,。成都正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液銷售廠家無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):因不含血清,批次間差異小,。
細(xì)胞凍存的基本原理:細(xì)胞代謝過程需要各種蛋白酶的參與,,而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作,低溫貯藏的目的是通過較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止,。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài),,使細(xì)胞“不會(huì)老”,所以可以長(zhǎng)期保存,。因?yàn)閮鋈谶^程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的,,因此,需要開發(fā)出有效的技術(shù)來防止細(xì)胞死亡和損傷,。低溫保護(hù)劑可保護(hù)細(xì)胞不受細(xì)胞內(nèi)冰凍影響,,目前多采用DMSO,,甘油,乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護(hù)劑,。它們的作用機(jī)制包括:自由進(jìn)入細(xì)胞,,取代水,使冰點(diǎn)下降,,充當(dāng)鹽的二次溶劑,,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力,。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,,電解質(zhì)等的改變,,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),,而且細(xì)胞一旦開始原代培養(yǎng),,它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要,。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久,;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程(省時(shí),、省錢),。
通用細(xì)胞凍存液(無血清)的簡(jiǎn)介:隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,,除了原代培養(yǎng)之外,,人工開發(fā)出來的細(xì)胞系的保存越來越重要。細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成,,減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷,,從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲得稀釋,,稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜,,這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Wo(hù)劑稀釋以后,,該濃度一般不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成毒性損傷。通用細(xì)胞凍存液(無血清)主要由培養(yǎng)基,、DMSO等組成,,不含血清,是一種經(jīng)典的無菌凍存液,。用于各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞,、傳代細(xì)胞系、雜交瘤細(xì)胞等的凍存,。細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存,。成都無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商
無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):無需液氮,-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存,。金華無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無血清凍存液注意事項(xiàng):1,、請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2,、凍存液加入細(xì)胞后,,請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存。3,、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上,。4、若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞,,請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存,。5、凍存液中含DMSO成分,,為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。無血清凍存液特性:1.不含動(dòng)物成分,。2.不需回溫,,完全即用型。3.適合各種動(dòng)物細(xì)胞,。4.適合無血清培養(yǎng)細(xì)胞與含血清培養(yǎng)細(xì)胞,。5.復(fù)蘇細(xì)胞存活率高。無血清凍存液用途:1,、無血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ),。2、細(xì)胞保藏中心,,無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存,。3、科研高校,,無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株凍存,。4,、無血清細(xì)胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細(xì)胞樣本保存。無血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件:1,、置于2~8℃避光保存,,有效期為1年;置于-20℃保存,,有效期為3年,;2、本產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,,超過保質(zhì)期,,必須放棄使用;3,、為確保產(chǎn)品質(zhì)量,,請(qǐng)避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。金華無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家