糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨,、垂體,、霉菌、色素,、淀粉樣物質(zhì),、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟,。PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原,、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原,。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,,不主張應(yīng)用唾液為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。江蘇提供糖原染色試劑盒服務(wù)電話
糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng),。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時(shí)過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,,放冰箱中保存。若溶液變紅,,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。浙江哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒廠家直銷生物膜與細(xì)胞器的研究,。
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,,均來自我室實(shí)驗(yàn)材料,。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL。1.2.3 過碘酸溶液 0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 無色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),,過濾,,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h
糖原染色(過碘酸-雪夫反應(yīng))原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合,形成紫紅色化合物,。沉積于含糖原的胞漿中,。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,,塊狀紅色為陽性,。無紅色顆粒為陰性_x000c_臨床意義1、正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)粒系:原粒細(xì)胞糖原含量很低,,隨著細(xì)胞的分化成熟,,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富,。淋巴細(xì)胞:糖原常凝聚成顆?;驂K狀。巨核細(xì)胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆?;驁F(tuán)塊,。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細(xì)胞白血?。涸剂<?xì)胞呈陰性或弱陽性反應(yīng),,以彌散性為主;急性淋巴細(xì)胞白血病原,、幼淋巴細(xì)胞多呈粗顆粒,、塊狀陽性反應(yīng)~故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。
糖原染色:1,、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,,糖原染色,。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,,紅色,定位于胞漿上,。3,、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,,用于某些的診斷等自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽性反應(yīng),。湖南咨詢糖原染色試劑盒銷售廠家
亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,。江蘇提供糖原染色試劑盒服務(wù)電話
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù),、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的,。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,。比如,,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來很簡單,所以組織化學(xué)技術(shù),,雖然已有幾十年到幾百年的歷史,,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)~江蘇提供糖原染色試劑盒服務(wù)電話