產(chǎn)品特性：a.可直接放置于-80℃冰箱,，無需降溫,，節(jié)省時(shí)間和精力,；b.即用型,，無需現(xiàn)配，操作方便,，可減少實(shí)驗(yàn)中因操作引起的污染,；c.在多種哺乳細(xì)胞系中經(jīng)過性能驗(yàn)證，其復(fù)蘇率和活率達(dá)90%以上,；d.可長期存儲于-80℃冰箱(5年以上),，取用方便；e.采用成分明確的無血清配方,，價(jià)格比常規(guī)自配細(xì)胞凍存液更為低廉,；保存溫度：2~8℃具體操作步驟：1、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細(xì)胞按常規(guī)方法消化,，或分離獲得原代細(xì)胞后,，收集于離心管中。2,、使用離心機(jī)離心,，去除上清，收集細(xì)胞沉淀,。3,、根據(jù)細(xì)胞生長密度加入適量的細(xì)胞凍存液進(jìn)行重懸，充分混勻(推薦凍存密度為1-2×106/ml),。4,、將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中，直接放置于-80℃冰箱保存,。24小時(shí)后可移入液氮長期保存(可選),。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：不含牛血清，無動(dòng)物源組分,。廈門無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家

細(xì)胞凍存中的注意事項(xiàng)：細(xì)胞凍存開始時(shí),，要溫好相應(yīng)的培養(yǎng)基和相應(yīng)的試劑，以及計(jì)數(shù)耗材,，避免操作過程中手忙腳亂,。用移液管吹打相應(yīng)的胞液時(shí)，要保證移液管在液面以下吹打,，管內(nèi)要有液體,，防止產(chǎn)生相應(yīng)的氣泡,，氣泡的張力會(huì)影響細(xì)胞的活率和生存狀態(tài),。計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)要保證取胞液時(shí)也要混勻,，這個(gè)過程比較重要，細(xì)胞不混勻,，計(jì)數(shù)不準(zhǔn),，此外吹打應(yīng)該輕柔，避免細(xì)胞在吹打的過程中出現(xiàn)了相應(yīng)的死亡,。凍存離心用50ml離心管比較好,，加凍存液吹打混勻比較方便，離心后不能過多地晃動(dòng)離心管,。當(dāng)離心管液體較多的時(shí)候,，可以直接傾倒，不要磕,，多余的液體較好用泵吸出比較好,。凍存支數(shù)少的情況，用泵頭輕柔吹打,，避免出現(xiàn)氣泡,，凍存支數(shù)多用移液管吹打。青島正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家即用型產(chǎn)品,，4℃可穩(wěn)定保存,。

細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清，可以現(xiàn)用現(xiàn)配,。除了這個(gè)方式,，還可選擇20%的DMSO機(jī)上80%的小牛血清，配成兩倍的儲存液,，在使用時(shí)細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,，特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存,。使用細(xì)胞凍存液需要注意以下幾點(diǎn)：1,、在使用凍存液前，需要確保細(xì)胞凍存液已經(jīng)完全融化,，并要輕輕的混勻,。對融化后的細(xì)胞凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。2,、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細(xì)胞生長情況比較良好,，比如說細(xì)胞需要處于對數(shù)生長期，并且凍存的時(shí)候存活率大于90%,。3,、在使用細(xì)胞凍存液期間，為了保證可以發(fā)揮較佳的效果,，建議將細(xì)胞凍存在液氮之中,，這樣可以長時(shí)間的進(jìn)行保存,。如果說將細(xì)胞置于-80℃的環(huán)境下保存，那么保存的時(shí)間大約為1年,。4,、細(xì)胞凍存液如果需要做標(biāo)記的話，要使用耐受有機(jī)溶劑的馬克筆進(jìn)行標(biāo)記,，以防被酒精或異丙醇等擦掉,，不能辨識。

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：離心問題：目前主要有兩種見解,。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),，去除DMSO,，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,，但對一般人來說,，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,，細(xì)胞就全被扔掉了,，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡,。此外在操作過程中容易污染,，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜（DMSO）,，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈,。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,，結(jié)果無有異常。細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封,，否則在復(fù)蘇過程中有可能會(huì)炸,。

細(xì)胞凍存液的操作步驟：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對數(shù)成長期的體細(xì)胞,，除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液,，用PBS清理。3.除去PBS,，添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm,，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱,，記數(shù),，調(diào)整凍存液中體細(xì)胞的較后相對密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.將體細(xì)胞分裝進(jìn)凍存管中，每管1～1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細(xì)胞的名字,，凍存時(shí)間及作業(yè)者;8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃下列時(shí)，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時(shí),，則可快速滲入液態(tài)氮中,。無血清細(xì)胞凍存液用途：無血清細(xì)胞凍存液用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存,。杭州長沙無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢：無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,。廈門無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家

含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問題：1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略),。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣，耗時(shí)耗力,。3.含血清,，細(xì)胞污染(細(xì)菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高,。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,，且不能原位（如孔板）凍存,。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分，含DMSO,、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是：將細(xì)胞凍存懸液（凍存管或孔板）直接放置-80℃冰箱長期保存,。廈門無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家