糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,,形成紫色化合物,,定位于細胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,,流水沖洗,,晾干鏡檢。細胞的組織化學方法,,是研究細胞成分常用的方法之一,。它是利用化學試劑與細胞內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學反應,從而在細胞局部形成有色沉淀物,,再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學成分進行定性,、定位、定量研究過碘酸氧化時間不宜過久,,氧化時的溫度以18~22℃佳,。江西品牌糖原染色試劑盒進貨價
含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應,。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,,放冰箱中保存,。若溶液變紅,即不能再用,。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個月,,變黃則失效,。糖原染色試劑盒。安徽咨詢糖原染色試劑盒哪家便宜糖原染色顯示在肝或心肌細胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診,。
可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽性反應,胞漿呈紅色,陰性反應,胞漿呈無色,;在正常血片中RBC不染色,;PLT染成深紅色;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒,;單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒,;少數(shù)淋巴細胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細胞和有核RBC都不染色,;巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關
粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色,。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性,。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外,。(4)溶于弱堿溶液,。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,,結(jié)果,;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,,核呈藍色,。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì),。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水,。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘,。(3)蒸餾水洗,。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,,水洗,。(6)常規(guī)脫水、封片切取材料時刀要銳利,,避免因擠壓細胞使其受到損傷,。
糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內(nèi)容十分普遍,主要包括,。①細胞核,、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究,。③細胞骨架體系的研究,。④細胞增殖及其調(diào)控。⑤細胞分化及其調(diào)控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化,。⑧細胞工程,。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),,主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),,因此也稱作糖原染色。另外,,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),,以及軟骨、垂體,、色素,、淀粉樣物質(zhì)、基底膜,、霉菌等,。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強氧化劑過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過染,。江西如何使用糖原染色試劑盒服務電話
冷凍切片染色效果不佳,成熟時間2個月,染色時間一般15-20分鐘,。江西品牌糖原染色試劑盒進貨價
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,,而且標本要新鮮,。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,,因無水酒精滲透較慢,,而且容易產(chǎn)生極化,,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3,、各種試劑必須化學純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥,,染色缸亦是。4,、如果Schiff氏試劑,,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,,使用時可考慮適當?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,,但不同批號,,其效果就可能不同,應特別引起注意江西品牌糖原染色試劑盒進貨價