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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-08-15

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá),,目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程,。單個(gè)miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個(gè)mRNA結(jié)合,,從而阻滯整個(gè)生物通路。因此,,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢,。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報(bào)道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),與75例健康者相比,,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA(miR-25和miR-223),。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個(gè)miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評估,結(jié)果顯示,,12個(gè)一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá),。Cazzoli等收集了30個(gè)血漿樣本,發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA(miR-378a,、-379a,、-139-5p,、-200b-5p)在肺病患者血清中明顯升高,,用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積(AUC)為0.908,。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量,。重慶外泌體提取試劑廠家直銷

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外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:純化和富集的完整血漿/血清,,尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,;樣本輸入量多樣,;無需耗時(shí)的超速離心,,過濾或特殊注射器,;無需沉淀試劑,,也無需過夜培養(yǎng);無需蛋白酶處理;適用于多種物種,;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白,;可以使用NanoSight®或電子顯微鏡分析純化的外泌體,以評估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體(exosomes)是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。它普遍存在并分布于各種體液中,攜帶和傳遞重要的信號分子,,形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),,影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)天津外泌體提取試劑哪里買逐漸取代超速離心法并推廣開來。有些試劑盒操作簡便,,不用超速離心,。

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在這項(xiàng)新的研究中,經(jīng)過基因修飾的外泌體(被稱作iExosome)能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,,從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解,,增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾(RNAi)的靶向方法:利用這些天然的納米顆粒(即外泌體)運(yùn)送小干擾RNA(siRNA)或短發(fā)夾RNA(shRNA)分子來靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因,,從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活,。他們證實(shí)外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用,這是因?yàn)檫@些納米大小的囊泡(即外泌體)輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞(包括病細(xì)胞)中,。

目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為,,外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),,再形成多泡體(multivesicularbodies,,MVB),較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì),、脂類、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見于1981年,,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為exosome,。對于外泌體的作用,,當(dāng)時(shí)推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),,所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng),。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原呈遞,、細(xì)胞分化、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中,。目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離,。用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體,置于80℃儲存?zhèn)溆谩?/p>

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所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。1983年,,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:純化和富集的完整血漿/血清,,尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體可用于功能研究。合肥外泌體提取試劑廠家

外泌體提?。褐貜?fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,,從而降低其質(zhì)量。重慶外泌體提取試劑廠家直銷

外泌體研究思路,。外泌體研究通常與高通量測序的聯(lián)系緊密,,研究思路可以分為三大類:表達(dá)譜、分子標(biāo)志物和分子機(jī)制方向,,其中表達(dá)譜思路的特點(diǎn)就是短平快,、通常以測序數(shù)據(jù)為主要內(nèi)容,短平快發(fā)表3-5分文章,。而分子標(biāo)志物的特點(diǎn)是在表達(dá)譜基礎(chǔ)之上加入大量樣本驗(yàn)證,,建立ROC,、KM曲線,分析分子與臨床疾病的相關(guān)性為主,,通常文章影響因子在3-10分之間,。分子機(jī)制研究,顧名思義要做到細(xì)胞功能,、機(jī)制研究深度,,因此工作量通常較大,影響因子通常能夠上10+,。唐山正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊,、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,,與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)重慶外泌體提取試劑廠家直銷