外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高,、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,，組分經(jīng)過優(yōu)化處理,，適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿,、尿液及其他體液（腦脊液,、腹水、羊水,、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取,，并搭配純化過濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時,，可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當血清,、血漿,、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,，可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心,。3.針對外泌體標志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進行Westernblot檢測，可以鑒定所提的外泌體,。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量,。外泌體提取：尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子,。貴陽外泌體提取試劑直銷價

外泌體相關蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來,，高通量質(zhì)譜分析被普遍地應用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究，這為我們揭示了更多具有生物標志物價值的分子,。Birgitte等采用微陣列芯片技術研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達情況,，發(fā)現(xiàn)CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達不光能區(qū)分一些病癥與正常組織,，同時也能區(qū)分各種肺病的組織亞型,。此外，聯(lián)合應用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達到0.74,。Clark等采用納升液聯(lián)用技術（nano-ESI-LC-MS/MS）分析了來自正常支氣管上皮細胞系和兩個攜帶NSCLC細胞系的外泌體的蛋白表達譜,，從中篩選出如細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達的蛋白,，同時檢測分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性,。由于國內(nèi)有關外泌體提取試劑的缺乏，我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進口提取試劑盒,。南京外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹超速離心法是目前外泌體相關文章中的主流方法,，由于離心步驟繁瑣。

外泌體項目獲批學科方向：從統(tǒng)計來看,，與前年相似外泌體立項集中的領域還是一些病癥學,，近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成，耐藥性，檢測等方面有關,。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態(tài)平衡,。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉運p-STAT3可促進結直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細胞外囊泡相關的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標志物的可能性,。此外,，在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病，中醫(yī)學及其他領域也有不少外泌體相關項目中標,。

外泌體的提取,、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法；尺寸排阻色譜法是利用分子篩理論,，較初是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術,。該方法的主要優(yōu)點是不需要很大的離心力，從而保證了外泌體的完整性,。Mol等[13]對比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,，結果顯示，后者得到的外泌體的蛋白豐度高于前者,。這些基于過濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應用提供了可能,。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來的一種方法，超濾一般被認為是外泌體分離過程中的一個準備過程,，通過超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì),。不過連續(xù)的超濾可以分離出外泌體，和超高速離心相比,，超濾不需要特殊的設備就可以較短時間內(nèi)分離出外泌體,。但是，超濾膜對外泌體的黏附作用會降低外泌體的產(chǎn)量,，并且超濾過程中施加的外力可能會使外泌體變形或者破裂,。可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,，以評估近似外泌體大小范圍和濃度,。

外泌體的形成與鑒定：首先，細胞膜內(nèi)陷形成一個杯狀結構,，包括細胞表面蛋白和與細胞外環(huán)境相關的可溶性蛋白,，導致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成,，或者是杯狀結構直接和已經(jīng)存在的ESEs融合,；trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes,，LSEs),，較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體),。MVBs是通過endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的,，這一過程導致MVBs含有多個ILVs,。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白,、細胞內(nèi)蛋白、RNA,、DNA,、氨基酸和代謝物。使用可截留100KD分子量的膜,，通過離心截留上清中的外泌體,，截留完成后。外泌體提?。捍胖榉ň哂刑禺愋愿?、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,。北京正規(guī)外泌體提取試劑進貨價

外泌體的提取分離：超速離心法（差速離心）,。貴陽外泌體提取試劑直銷價

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法,。常用的是超高速離心法,，該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養(yǎng)液或生物流體獲得外泌體,，經(jīng)過400×g,、2000×g、10000×g的低速離心,，除去細胞及大的細胞分泌物,；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12]。超高速離心因操作簡單,，不需要復雜的技術支持,，并且成本相對較低而被普遍使用。但是該方法耗時,、產(chǎn)率低,，得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉子的類型、轉子沉降角度等因素影響,，其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,，但也會有其他的囊泡,、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。貴陽外泌體提取試劑直銷價