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深圳正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-30

鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過(guò)夜,。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜,。自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,。深圳正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)

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鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,其特征在于,包括以下步驟:(1)將無(wú)組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,,真空冷凍干燥備用;(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目,;(3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,期間不斷攪拌,,防止凍結(jié)成塊,,得到膠原溶脹液;(4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,,鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50:I?100:1,,在4°C,48?74小時(shí)酶解,,期間間歇性攪拌,。廈門鼠尾膠原廠家推薦膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料。

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鼠尾膠原使用方法:1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,,用無(wú)菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。開(kāi)蓋在超凈臺(tái)上過(guò)夜晾干,,也可以在室溫放置1小時(shí)后,用PBS洗3~4次后直接使用,。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間,。三維膠原凝膠的制備:A、無(wú)細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,,加入690μL雙蒸水,,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值)。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。方法通過(guò)醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構(gòu)成膠原纖維,。然后,,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6d,通過(guò)透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化,。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2d后,,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化,;礦化6d后,,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料,。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,,經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜,。

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一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀,;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,、陰離子交換樹(shù)脂進(jìn)行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí),,然后真空冷凍干燥,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,,滅菌,、包裝,得到成品膠原蛋白粉末,。稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,。武漢正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

可直接或間接參與細(xì)胞的附著。深圳正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說(shuō)明:不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻。再加入100ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。深圳正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)

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