外泌體(Exosomes)是細胞分泌到胞外的一種囊泡(ExtracellularVesicles,,EVs),,其大小為30-150nm,具有雙層膜結構和茶托狀形態(tài),,含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等),參與細胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液,、唾液,、尿液、乳汁等,,同時也存在于組織樣本中,,如腦組織、肌肉組織,、脂肪組織等,。腦組織分離方法簡述:將腦組織剪成薄片,放入離心管中加上消化液進行消化,,經(jīng)水浴,、反復輕輕上下顛倒,再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束,。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中,,混勻,置于冰上,。再進行一系列的差速超速離心過程,,包括除雜、濾膜過濾,、超離等,。較后用PBS重懸外泌體,用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡(TEM),、納米粒徑追蹤分子(NTA)和markerWB鑒定,。利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體。成都正規(guī)外泌體提取試劑服務電話
功能:當外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構成及運輸,、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能,。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答,、抗原提呈,、細胞遷移、細胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面,。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,,促進了一些病癥的生長與侵襲,。成都正規(guī)外泌體提取試劑服務電話使用PBS對膜進行洗脫即得到外泌體濃縮液。
外泌體是細胞間進行物質(zhì)運輸和信息交流的重要工具,,可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進一些病癥的增殖,,血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移。與細菌傳染,,幫助細菌逃避免疫關系很大,,并與心血管疾病,老年癡呆等疾病具有密切關系,。外泌體可通過流式,、WB(檢測指標有CD9,CD63,CD81)、電鏡觀察,、NTA粒徑追蹤等手段檢測,,普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker,、精細醫(yī)療,、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小,,樣本含量低,,提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心,、超濾離心法,、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等,。但到目前為止,,仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性。
所有的細胞都能分泌外泌體,,但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性,,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,,調(diào)控細胞生理活動,。同時,外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸,、誘導正常細胞轉(zhuǎn)化、促進一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,;此外,,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。外泌體相關數(shù)據(jù)庫有哪些,?lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,,包括circRNA、lncRNA和mRNA,。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白,、mRNA、miRNA,、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人,、大鼠,、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結果,,涉及蛋白,、mRNA、miRNA,、脂類等信息,。嚴重阻礙了我國在外泌體的研究和臨床應用上的發(fā)展。
為了分離外泌體,,研究人員用兩個這樣的單元串聯(lián)構建了一個裝置,。首先,使用聲波從血液樣品中除去細胞和血小板,。一旦細胞和血小板被去除,,樣品進入第二個微流體單元,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細胞外囊泡分開,。這項工作的通訊作者之一,,麻省理工學院材料科學與工程系科學家MingDao博士說:“聲波更溫和。而且在分離時,這些囊泡受處理的時間只有1秒鐘或更短,。這是一個很大的優(yōu)勢,。”使用該設備,,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘,。“這種新技術可以解決當前外泌體分離技術的缺點,,如周期長,,一致性差,產(chǎn)量低,,污染以及完整性受損等,。我們想要把提取高質(zhì)量的外泌體的過程簡化為按一個按鈕就在10分鐘內(nèi)獲得所需樣品一樣簡單?!毖芯咳藛T們說,。外泌體的提取、分離方法:開發(fā)高效,、快速,、穩(wěn)定,并且保持外泌體結構和生物功能完整性的方法,。成都正規(guī)外泌體提取試劑服務電話
直接把外泌體從尿液中沉降下來,,無須分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基。成都正規(guī)外泌體提取試劑服務電話
人體幾乎所有類型的細胞都能分泌外泌體,,外泌體普遍存在并分布于各種體液中,,攜帶多種蛋白質(zhì)、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)類物質(zhì)等,,作為重要的傳遞信號分子,形成了一種全新的細胞-細胞間信息傳遞系統(tǒng),,可參與細胞通訊,、細胞遷移、血管新生和一些病癥細胞生長等過程,。外泌體與微泡:我們知道,,細胞間相互作用可以通過釋放蛋白質(zhì)、核酸,、脂質(zhì)等分子到胞外與受體結合從而介導胞內(nèi)細胞傳導,。除此之外,細胞還可以釋放膜囊泡,,外泌體與微泡就是其中兩種,,二者相似但形成方式不同:外泌體是細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中的膜囊泡,而微泡則是細胞出芽與細胞膜融合后直接脫落形成的囊泡,,且外泌體大小均一,,直徑在40~100nm,其大小取決于其起源部位以及細胞中的脂質(zhì)雙層結構,;而微泡大小不一,,直徑在50~1000nm之間。唐山正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹在超速離心力作用下,,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,,是一種區(qū)帶分離法成都正規(guī)外泌體提取試劑服務電話
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