糖原染色:1,、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類,。過(guò)碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,。2、原理PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,,糖原染色,。一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合,,紅色,定位于胞漿上,。3,、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,,糖尿病的診斷和研究,,用于某些的診斷等~適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。浙江咨詢糖原染色試劑盒推薦廠家
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基,。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中,。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,,晾干,。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,,晾干,。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,,晾干鏡檢,。細(xì)胞的組織化學(xué)方法,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一,。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),,從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,再通過(guò)顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性,、定位,、定量研究。福建糖原染色試劑盒推薦廠家巨幼紅細(xì)胞貧血,、溶血性貧血,、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性。
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,,該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨,、垂體、霉菌,、色素,、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等,。過(guò)碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化,,這是很關(guān)鍵的步驟,。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原,。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來(lái)催化糖原的糖苷鍵水解,,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液,。
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說(shuō)明書進(jìn)行染色,。②在染色過(guò)程中,前一個(gè)染液浸染完成后,,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟,。③ 每次滴加染液前,,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,,造成染色不佳,。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,,但不能溢出圈外,,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),,用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈,,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出在染色過(guò)程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙。
糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng),,染色時(shí)間10~20min(染色時(shí)間長(zhǎng)短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,,SO濃度高,染色時(shí)間適當(dāng)縮短,;環(huán)境溫度高,,染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短,反之則需適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間),。染色過(guò)程中不能接觸伊紅,,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時(shí),,較好作消化對(duì)照,,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,,用1%淀粉酶于37℃消化30min,,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽(yáng)性,,即肯定為糖原[6],。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,,因此,,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過(guò)一次即應(yīng)廢棄,。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純,。器皿、染色缸必須潔凈而干燥,。操作簡(jiǎn)單方便,,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。浙江哪家提供糖原染色試劑盒平均價(jià)格
將動(dòng)物殺死后迅速取出所需要的組織,。浙江咨詢糖原染色試劑盒推薦廠家
糖原染色 用于鑒別淋巴系統(tǒng)細(xì)胞增生的性質(zhì)鑒別紅細(xì)胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細(xì)胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤,、急慢性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)PAS積分升高巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血,、再障貧血時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病,、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達(dá)100--200以上用于不典型巨核細(xì)胞與李-斯細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性后者為陰性或弱陽(yáng)性,;用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性而后者反應(yīng)為陰性或弱性浙江咨詢糖原染色試劑盒推薦廠家