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RNA極速提取試劑盒:本試劑盒采用獨特的裂解液,,可快速可靠從組織、細胞,、抗凝全血,、病毒液樣本中純化出高純度的總RNA。該RNA提取試劑盒是目前國際上操作步驟較少,、用時較短的RNA提取試劑盒,。應(yīng)用本試劑盒提取的RNA可直接用于反轉(zhuǎn)錄、基因克隆,、定量檢測,、文庫構(gòu)建、雜交等多種分子生物學實驗,。RNA極速提取試劑盒產(chǎn)品特點:1.用時較短:極強的裂解能力使得樣品瞬間裂解,,組織細胞樣品可在5分鐘內(nèi)完成總RNA的提取。2.超高純度:該試劑盒采用柱式純化,,獲取的RNAA260/A280為2.0~2.2,,A260/A230為1.9~2.1,。3.高質(zhì)量RNA:使用該試劑盒獲取的RNA完整性良好。4.使用安全:無需酚/氯仿抽提,,減少了有毒有害物質(zhì),。5.操作極簡化:只需將樣品與裂解液A和B混合,經(jīng)一步掛柱和洗脫即可獲得高質(zhì)量總RNA,。植物花總RNA提取試劑盒:效去除植物花組織中的多糖,、多酚類等雜質(zhì)。寧波天津RNA提取試劑
RNA提取試劑注意事項:1,、需自備氯仿,,異丙醇,DEPC,,75%乙醇(DEPC水配制),,和DEPC水。2,、所有離心管,,泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶,,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,,然后滅菌,烘干,。溶液需用DEPC水配制,。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,處理過夜,,滅菌即成DEPC水,。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些,。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品,。如果不能及時抽提RNA,推薦先加入適量TRIReagent,,并裂解樣品后凍存,。溫州重慶RNA提取試劑其價格比進口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,,性價比還可以,。
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:RNA完整性的電泳檢測:如果需要做Northern雜交,強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳,,因為非變性膠不能分離所有的RNA分子,。注意:大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個小的片段,彼此用氫鍵相連,所以在甲醛變性膠中,,沒有28S帶出現(xiàn),。RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定:將5~10μLRNA溶于TE緩沖液中(pH7.5~8.2之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),,進而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量),。RNA純度測定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8~2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng),。
RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸,。區(qū)別:紫外吸收:核酸的λm=260nm,堿基展開程度越大,,紫外吸收就越厲害,。當A=1時,DNA:50ug/ml,,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280還可來表示核酸的純度,。沉降速度:對于拓撲異構(gòu)體(核苷酸數(shù)目相同的核酸),,其沉降速度從達到小依次為:RNA;超螺旋DNA>解鏈環(huán)狀DNA;松弛環(huán)狀DNA;線形DNA也就是在離心管中較上層是線形DNA,較下面是RNA,。電泳:核苷酸,、核酸均可以進行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,,因此,,電泳是測定核酸分子量的好方法。DNA分子量測定較直接的方法:用適當濃度的EB(溴嘧啶)染色DNA,,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,,用電鏡測出其長度,按B-DNA模型算出bp數(shù),,根據(jù)核苷酸的平均分子量就可計算出DNA的分子量,。這種情況下,可以在裂解緩沖液中立即進行溶解,。
細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:1.有效分離和提取細胞質(zhì)RNA,,與細胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式,。3.提取的RNA,,品質(zhì)高,產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚,,可提取所有RNA(含RNA),。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用,包括RT-PCR,,qRT-PCR,,RNA-Seq,陣列等,。6.細胞質(zhì)RNA不含DNA,,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR。7.試劑盒可用于哺乳動物細胞或者組織樣品的提取,。在某些情況下,,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA,。例如,,在一些表達譜研究中,較好能夠提取成熟的細胞質(zhì)(Cytoplasmic)RNA,?;蛘撸谘芯糠治鑫醇艚拥腞NA前體時,,提取細胞核(Nuclear)RNA會是一個更好的選擇,。然而,市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來提取細胞質(zhì)與細胞核的RNA,,不光費用高昂,,而且浪費大量的材料與時間。該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,,簡單,,經(jīng)濟有效的方法細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA,。徐州深圳RNA提取試劑
mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板,。寧波天津RNA提取試劑
RNA穩(wěn)定方法:1.在裂解緩沖液中立即溶解,使RNase失活,。然后樣品可以立即處理或冷凍保存,。2.浸泡在穩(wěn)定試劑中(如DNA/RNAShield),使核酸酶失活,,并在環(huán)境溫度下長時間保護核酸,。這對正在實地收集樣本或處理珍貴的病人樣本(例如組織活檢、全血等)的研究人員特別有幫助,。確保樣品完全溶解:在RNA提取過程中,,較大限度地提高RNA產(chǎn)量和質(zhì)量的較佳方法是保證樣品的完全裂解,。然而,并不是所有的樣本都對相同的裂解方案敏感,。例如,,血細胞(如淋巴細胞、PBMCs等)和微生物細胞往往更難以有效地溶解,。光光添加基于洗滌劑的裂解緩沖液可能并不總是足夠的,。為了提高裂解效果,可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配,,或者在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶K,、溶菌酶等)。寧波天津RNA提取試劑