實驗應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,,細胞角蛋白18表達陽性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,,并且制作簡便,成本低廉,。建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。蕪湖昆明鼠尾膠原
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,,之前多從牛皮、豬皮,、牛腱中提取,,但這類膠原蛋白不光有油脂等其他雜質(zhì),也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型,;同時,,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒傳染,如果用此開發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質(zhì)的不穩(wěn)定及潛在的風(fēng)險及危害,;再次,,人的真皮中主要含有I型和III型,但III型不易大量獲得,,故應(yīng)用單一的I型膠原蛋白是解決體外應(yīng)用的醫(yī)用產(chǎn)品引起的抗原性問題的關(guān)鍵,,這也是I型膠原蛋白抗原性低的原因之一。同時,,I型膠原蛋白的三重螺旋的氨基酸結(jié)構(gòu)決定了它的一些特有的性能,,如機械性能、促進細胞生長,、弱抗原性,、可生物降解性和膠原的自締合性。天津正規(guī)鼠尾膠原廠家供應(yīng)可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細胞前用無菌的水漂洗,。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS,,使用前需要加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。B.含細胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。注意事項:在室溫下pH中性時可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫,。
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,。
膠原蛋白的適用征狀:1,、由于工作勞累,睡眠不足形成的皮膚晦暗無光,、發(fā)黃,、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2,、由于年齡,、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂,、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3,、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,,大量沉積皮膚表面,肌膚不能及時代謝出異常黑色素,,形成各種色斑,。4,、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷,過早出現(xiàn)細紋,皮膚干燥,、脫皮、,、毛孔粗大等不良癥狀,。5、由于內(nèi)分泌功能紊亂,,皮膚膚質(zhì)差,、皮膚發(fā)油、發(fā)暗,,易長青春痘留下的色印,、色素沉著等。6,、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題,。7.長期電腦旁工作,電腦輻射造成脫發(fā),,內(nèi)分泌紊亂問題,。吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克),。珠海正規(guī)鼠尾膠原哪里買
自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,,細胞角蛋白18表達陽性。蕪湖昆明鼠尾膠原
一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,,其特征在于,,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,用無花果蛋白酶進行酶解處理,,再用雙氧水溶液殺酶,;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,然后用乙酸溶液溶脹,,把溶脹后的切片分散攪拌,,然后用濾網(wǎng)過濾,除去雜質(zhì)及不溶脹物,,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液,;(2)手術(shù)縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機的紡絲液貯罐中,用氮氣擠壓入含有pH=8-11,、質(zhì)量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,,再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,再經(jīng)過假捻器加捻,,合股后再進入含有pH=9-11,、質(zhì)量濃度為0.8-1.2%戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián),,經(jīng)過水浴水洗,再經(jīng)第二次加捻,,除去水及交聯(lián)劑,,干燥后,在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線,。蕪湖昆明鼠尾膠原