鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法,。各個(gè)材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,,采用冷凍干燥工藝制備。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收,、容易引起機(jī)體過敏、止血效果差等缺點(diǎn),,本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,,生物相容性好;止血效果快,,具有很強(qiáng)的親水性,;同時(shí)可啟動(dòng)血小板的凝聚,一旦血小板凝聚,,就可形成血栓,,進(jìn)而促使血漿結(jié)塊阻止血流。同時(shí),,膠原表面的特定區(qū)域可以與細(xì)胞表面存在的類似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,,可以起到防止腸粘連的功效,。I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體。武漢鼠尾膠原產(chǎn)品介紹
詳細(xì)步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min,;2.將尾巴剪開,、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),,抽出銀色的尾鍵,;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,0.1%消過毒的醋酸中,,4℃放置,,并不時(shí)振蕩;4.48h后取上清,,4000轉(zhuǎn)離心30min后,,取上清;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存,。有時(shí)可繼續(xù)向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,,重復(fù)以上步驟,,以制備更多的鼠尾膠。在使用時(shí),,先將冰存的膠原液在室溫下解凍,,再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿:1)用吸管吸取膠原液,在無(wú)菌的培養(yǎng)器皿的生長(zhǎng)面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液,。2)若包被的是培養(yǎng)瓶,,可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶?jī)?nèi)后,,即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞。若為培養(yǎng)皿或板的話,,可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內(nèi),,將浸有氨水的棉球放入飯盒內(nèi),,蓋緊飯盒蓋,,四周用封口膠封死。廈門正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡,。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,,平均厚度約為1mm,;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接,;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的;同一來(lái)源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,,為今后研究鼻內(nèi)用藥對(duì)纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑,。
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉,。一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,。
鼠尾膠原:含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值)。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫,。保存條件4℃保存,,切勿凍存,有效期一年,。鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中,。長(zhǎng)沙正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家
鼠尾膠原醋酸溶解:在2-8度中放置過夜。武漢鼠尾膠原產(chǎn)品介紹
膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),,使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致,。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì),;3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán).所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng).這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中,。武漢鼠尾膠原產(chǎn)品介紹