無血清細(xì)胞凍存液:采用patent的凍存配方,用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途,。用包括DMSO在內(nèi)的復(fù)合凍存保護(hù)劑替代了單一的DMSO的保護(hù)作用,。復(fù)合保護(hù)劑的內(nèi)部保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞膜,,避免在細(xì)胞凍存過程中細(xì)胞內(nèi)部的水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,;外部保護(hù)劑,可在溶液形成冰晶之前,,在細(xì)胞膜外部競爭性的結(jié)合細(xì)胞膜表面的水分子,,從而降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,。在細(xì)胞內(nèi)部與外部的協(xié)同保護(hù)作用下,,明顯降低了溫度迅速下降與溫度上升對細(xì)胞的損害,因此大幅度提高了細(xì)胞經(jīng)過凍存后的復(fù)蘇存活率,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:通用型,,適用于凍存各種細(xì)胞系,原代細(xì)胞,。重慶正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦
以前在另一家實驗室的時候,凍存細(xì)胞根本就沒有講究這些標(biāo)準(zhǔn)操作,。凍存的細(xì)胞有293T,、PT67、C2C12,、MEF(鼠胚胎成纖維細(xì)胞),、HelaS3、HelaD,、U2OS,、HKC、RK3E,、ECO,、H292、HSY,、COS7,、SupT1等。將細(xì)胞酶消化后直接參與離心,,加入凍存液(含90%的血清和10%的DMS0),,直接放在-80℃冰箱。兩三天后移入液氮中,,較久保存,,幾年后細(xì)胞的活力仍沒有什么受損,,照常能復(fù)蘇,成活率高,。但有三點須注意:(1)一是細(xì)胞的生長狀態(tài)要好,,不能長得過稀,同樣也不能過密,,細(xì)胞的狀態(tài)看起來相當(dāng)健康,。70%密度的要保存的細(xì)胞須再長24h才能全滿,萬一細(xì)胞狀態(tài)不好,,可以酶消化后再繁殖一次,;(2)凍存細(xì)胞的量要留心,不能太密也不能太稀,,一般1OOmm培養(yǎng)皿的細(xì)胞凍存為3~4管,;(3)存放在-80℃冰箱的時間不能過長,一兩天后轉(zhuǎn)移到液氮罐里,。我們也曾取出存放在-80℃冰箱的細(xì)胞,,半年還有30%~50%的細(xì)胞有活性,但一年的細(xì)胞就沒有活的,。開封正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液直銷廠家無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:提高細(xì)胞存活率和活力,,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。
無血清細(xì)胞凍存液,,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,,平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,,BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,,BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。復(fù)蘇細(xì)胞:1.將細(xì)胞凍存管由液態(tài)氮中取出,,置于37度水浴快速溶解回溫,。此時可準(zhǔn)備培養(yǎng)基、無菌15ml離心管,、培養(yǎng)瓶,。2.于生物安全柜內(nèi),直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融,,使細(xì)胞團(tuán)塊化凍,。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基,再將化凍的細(xì)胞懸液加入離心管中,。以200~300g,,3分鐘離心收集細(xì)胞。4.倒去上清液,,以新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,,移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),。5.隔天更換新鮮培養(yǎng)基,并觀察細(xì)胞存活狀況,。
細(xì)胞凍存經(jīng)驗談:選對凍存培養(yǎng)基才是王道:研究人員經(jīng)常需要冷凍細(xì)胞并保存,,以供后續(xù)實驗或臨床使用?;具^程相當(dāng)簡單:慢慢冷凍細(xì)胞,,將凍存管放入液氮中,并在需要時快速解凍,。凍存培養(yǎng)基能支持細(xì)胞并防止冰晶形成,。不過,Malfavon的體驗告訴我們,,使用不同的凍存培養(yǎng)基,,結(jié)果那可是大不同。一些經(jīng)驗老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基,。不過,,那些面對脆弱細(xì)胞(比如原代和多能細(xì)胞)的研究人員,則更喜歡購買標(biāo)準(zhǔn)化的商業(yè)產(chǎn)品,。一些非常敏感的細(xì)胞系也許能從添加物中受益,,以避免細(xì)胞在解凍時凋亡。無血清細(xì)胞凍存液存儲條件:為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,。
無血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)勢:簡單,、方便、快捷,。1.即用型,無需現(xiàn)配,,可直接使用,。2.可孔板原位凍存,可微量凍存,,無需使用凍存管,。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,,操作簡單,。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染,。5.因不含血清,,批次間差異小。6.無需液氮,,-80℃冰箱長期凍存,。無血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的方法:1.驗證陽性克隆的細(xì)胞培養(yǎng)孔,,將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈;2.加入適量Cellregen無血清細(xì)胞凍存液,,充分浸潤細(xì)胞(無需消化細(xì)胞),;3.蓋上蓋板,直接放入-80℃冰箱,,長期冷凍保存,。無血清凍存液用途:細(xì)胞保藏中心,無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長期保存,。開封正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液直銷價
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:成分明確,,無批次差異。重慶正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦
血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體,。如將血液自血管內(nèi)抽出,,放入試管中,不加抗凝劑,,則凝血反應(yīng),,血液迅速凝固,形成膠凍,。凝血塊收縮,,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得,。在凝血過程中,,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,,這一點是與血漿比較大的區(qū)別,。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),,各凝血因子也都發(fā)生了變化,。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失,。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同,。為避免抗凝劑的干擾,,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品,。重慶正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦