細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,，機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成，但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,，內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的,。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,，隨著溫度的降低,，細(xì)胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,，這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,，隨著溫度的降低,，細(xì)胞外部的水分會首先結(jié)冰,，從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長,，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞,，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，在復(fù)溫時,，大量水分會因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),，造成細(xì)胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷,。將分裝好的細(xì)胞凍存管,，直接置于-80 度冰箱過夜保存。南京北京無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)：1.為保持細(xì)胞較大存活率,，一般都采用慢凍存融的方法,。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度為－1℃~12℃/分鐘,，當(dāng)溫度下降達(dá)－25℃時,，下降速度可增至－5~－10℃/分鐘，到－100℃時則可迅速凍入液氮中,。因此要適當(dāng)掌握凍存物下降入液氮中的速度,，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促冰晶形成,。3.初次凍存者在下降凍存時,，宜先用細(xì)木棒伸入罐中探測液面位置，然后需用溫度計與凍存物并行的辦法,，以觀測下降凍存物的速度,、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關(guān)系，當(dāng)已掌握以上各參數(shù)和凍存技術(shù)熟練后,，光按下降時間和下降距離便可獲理想凍存效果,。唐山無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色：通用型，適用于凍存各種細(xì)胞系,，原代細(xì)胞,。

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：1、從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,，但為對數(shù)生長期細(xì)胞,。在凍存前一日換一次培養(yǎng)液;2、將凍存管放入液氮容器或從中取出時,，要做好防護(hù)工作,，以免凍壞;3、凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。4,、取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,，護(hù)目鏡。此項(xiàng)特別重要,，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致炸列,。凍存液產(chǎn)品針對細(xì)胞凍存的特殊配方,，能較大降低細(xì)胞在凍存過程中冰晶對于細(xì)胞的損傷，有效提高細(xì)胞復(fù)蘇率和活力,。

無血清細(xì)胞凍存液與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液比較及優(yōu)勢：1.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液只適用于含血清細(xì)胞的凍存,，但并不適用于無血清培養(yǎng)的細(xì)胞，例如一些CIK細(xì)胞等,，而無血清細(xì)胞凍存液即適用于含血清細(xì)胞的凍存,，又適用于無血清細(xì)胞的凍存，是一種通用型細(xì)胞凍存液,，通用于各種動物細(xì)胞株,；2.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含10%胎牛血清，因血清是動物源性成份,，因此病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險很高，而無血清細(xì)胞凍存液因不含血清,，只含DMSO,、葡萄糖等營養(yǎng)成份，較大降低了動物血清來源病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險,，確保凍存細(xì)胞的安全；3.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含血清,，但動物血清成分復(fù)雜,，個體差異大，且生產(chǎn)來源不穩(wěn)定,，因此批次間質(zhì)量常常不穩(wěn)定,，這導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)也會受到影響，而無血清細(xì)胞凍存液成分和配比明確,，批次間差異很小,，能夠保證生長細(xì)胞狀態(tài)的穩(wěn)定性，細(xì)胞存活率高,。無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞,、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲,。

細(xì)胞冷凍的原理：細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力,。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷,。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,，起到了細(xì)胞保種的作用,。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買,、寄贈,、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),，可使溶液冰點(diǎn)降低,，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出,，減少了冰晶形成,，從而避免細(xì)胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活,。無血清細(xì)胞凍存液存儲條件：3個月以上沒有使用凍存液計劃時,，盡可能-20℃冷凍保存。廣州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液單價

PH,，電解質(zhì)等的改變,，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。南京北京無血清細(xì)胞凍存液

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),，并可減緩冷卻速度,，較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡),。注：DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織,。操作含DMSO的試劑時，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑,。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細(xì)胞凍存液,，使用方便，復(fù)蘇率高,。注意冷凍保護(hù)劑DMSO的品質(zhì)：DMSO應(yīng)為試劑級等級,，無菌且無色，以5-10ml小體積分裝,，4℃避光保存,，勿作多次解凍。南京北京無血清細(xì)胞凍存液