特殊染色化學(xué)試劑的選擇:化學(xué)試劑的選擇主要針對自配試劑而言,,對于商品化試劑盒則在于染液質(zhì)量,。1、一般要求選用很好品牌的化學(xué)試劑,,特別是一些染色中關(guān)鍵的試劑,。很好的化學(xué)試劑(如Sigma、國藥,、阿拉丁,、西隴等)是保證高質(zhì)量染液的前提和關(guān)鍵,特別對于染液中的關(guān)鍵試劑尤為重要,。如堿性品紅在一些染色液(抗酸,、無色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,,其質(zhì)量決定了較終的染色效果,。如配制無色品紅染液時(shí),所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質(zhì)量不合格,,則會導(dǎo)致染液配制失敗,,無法染出合格的切片。2,、純度一般以分析純?yōu)橹?。一般厚度不超過3mm,大小不超過5×5m㎡,。上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家現(xiàn)貨
糖原染色臨床意義:1,、急性淋巴細(xì)胞白血病,、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病,、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng),;缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng),;急性粒細(xì)胞白血病,、急性單核細(xì)胞白血病、良性淋巴細(xì)胞增多癥,、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng),。巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血,、再生障礙性貧血等,,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng)。偶有個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng),。2,、幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞,巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng),;霍奇金細(xì)胞呈弱陽性或陰性反應(yīng),。3、幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng),。湖南口碑好的糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。
注意事項(xiàng):染色前:①切出的石蠟切片要好,,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚,。②撈片時(shí),較好一張玻片撈一個(gè)組織,,組織較好位于玻片的中間,,美觀的同時(shí)也利于脫蠟(有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候,達(dá)不到脫蠟的目的),。③石蠟切片脫蠟到水時(shí),,一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時(shí)間不能太少)以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,,在染色時(shí)染色液未能充分與組織接觸,,較終導(dǎo)致染色效果不佳,甚至染不上顏色,。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,,以避免脫蠟時(shí)把標(biāo)簽紙也浸沒,致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上,,造成染色不佳,。
糖原D-PAS染色液注意事項(xiàng):1、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,否則影響染色效果,。需使用一張陽性對照片驗(yàn)證酶的活性,。2、過碘酸氧化時(shí)間不宜過久,,氧化時(shí)溫度以18~22℃較佳,。3、試劑(A),、試劑(B),、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,,使用時(shí)避免接觸過多的陽光和空氣,,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用,。4,、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。5,、在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時(shí)間非常重要,,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定,。6,、況冶切片染色時(shí)間盡量要短。擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊(duì)伍,,保證實(shí)驗(yàn)快速,、有效的完成。
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷,。細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,。福建品質(zhì)好的糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
加入少量活性碳并震蕩,、過濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無色,。上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家現(xiàn)貨
糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1、糖原的固定要及時(shí),,而且標(biāo)本要新鮮,。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端),。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3,、各種試劑必須化學(xué)純,,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,,染色缸亦是。4,、如果Schiff氏試劑,,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,,但不同批號,其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意,。上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家現(xiàn)貨