實驗應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),,應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開,;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的,;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑。制備鼠尾膠原:取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,。長沙鼠尾膠原哪里買
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方面,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實驗室設(shè)備的內(nèi)部涂層,。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥,。它還可以用來制造一種凝膠,可當作懸浮細胞的培養(yǎng)基,。此外,,還可以把它當膠水使用。在化妝品行業(yè),,鼠尾膠原蛋白可當作沐浴液和肥皂中的凝膠,。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護膚霜。不過,,用于撫紋,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?;蜇i提取,。不過,用于撫紋,,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?;蜇i提取。廈門鼠尾膠原供應(yīng)商我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白,。
膠原蛋白的適用征狀:1、由于工作勞累,,睡眠不足形成的皮膚晦暗無光,、發(fā)黃、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2,、由于年齡,、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂,、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3,、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,,大量沉積皮膚表面,肌膚不能及時代謝出異常黑色素,,形成各種色斑,。4、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當使膚質(zhì)受到損傷,,過早出現(xiàn)細紋,皮膚干燥,、脫皮、,、毛孔粗大等不良癥狀,。5、由于內(nèi)分泌功能紊亂,,皮膚膚質(zhì)差,、皮膚發(fā)油、發(fā)暗,,易長青春痘留下的色印,、色素沉著等。6,、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題,。7.長期電腦旁工作,電腦輻射造成脫發(fā),,內(nèi)分泌紊亂問題,。
鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫無菌的環(huán)境,,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,,進行多次真空冷凍干燥,,并經(jīng)進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,;較后由滅菌、無菌包裝,,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu),。I型膠原蛋白分布非常普遍,,是主纖維束的主要成分。
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,,成本低廉,。按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。石家莊鼠尾膠原廠家直銷
利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,,該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ)。長沙鼠尾膠原哪里買
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,,它具有促進體外培養(yǎng)細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,,同時它也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,,制備細胞爬片時,,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。通過本實驗可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,,并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。實驗設(shè)備及材料:大鼠尾巴、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿、三角燒瓶,、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實驗內(nèi)容:1,、制備鼠尾膠原。2,、切割小玻片,。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,,成本低廉,。長沙鼠尾膠原哪里買