Trizol是一種總RNA抽提試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),,能迅速裂解細(xì)胞,,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性,。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA,。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,,Trizol試劑可保持RNA的完整性,,同時能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分,。加入氯仿離心后,,裂解液分層成水相和有機(jī)相。RNA存在于水相中,。水相轉(zhuǎn)移后,,RNA通過異丙醇沉淀回收,。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì),。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì),,進(jìn)行密度梯度超速離心,,RNA沉淀于管底,而DNA與蛋白質(zhì)在上清液中,。使用這種方法,,不但能得到高質(zhì)量的RNA,而且能同時分離出細(xì)胞染色體DNA,。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:操作安全可靠,,無需酚抽提。蘇州RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一,、原理簡介,。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。二,、試劑盒特點:1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題,。3,、獨有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染,。4,、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高,。5,、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,,提高了純度。蕪湖鄭州RNA提取試劑植物花總RNA提取試劑盒:可以從多糖多酚植物的根,、莖,、葉以及花組織中快速提取總RNA。
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:RNA完整性的電泳檢測:如果需要做Northern雜交,,強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳,,因為非變性膠不能分離所有的RNA分子。注意:大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個小的片段,,彼此用氫鍵相連,,所以在甲醛變性膠中,沒有28S帶出現(xiàn),。RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定:將5~10μLRNA溶于TE緩沖液中(pH7.5~8.2之間)檢測其在OD260的光吸收,。通過光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),進(jìn)而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量),。RNA純度測定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8~2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),,高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng),。
酵母RNA的提取方法:濃鹽法。酵母菌外層是厚達(dá)1.2μm的細(xì)胞壁,,其化學(xué)成分是葡聚糖(30-40%)和甘露聚糖(30%),,此外,脂類8.5-13.5%,,蛋白質(zhì)6-8%,,還含有幾丁質(zhì),酵母菌的葡聚糖,,分子是為240000道爾頓,,是一種分枝聚合物,葡聚糖與甘露糖之間由蛋白質(zhì)維系起來,。近10%的甘露聚糖的側(cè)鏈通過磷酸二酯鍵與磷酸邊接,,所有這些連接方式都使得酵母提取物首要的也是關(guān)鍵的是如何破壞細(xì)胞壁。破壁方法有自溶破壁,、酶法破壁等多種方法,,而用高濃度鹽溶液處理,同時加熱,,以改變細(xì)胞的通透性,,就可以使核酸從細(xì)胞內(nèi)釋放出來。由于RNA鈉鹽易溶于水,在含鹽的菌體溶液中,RNA有較高的溶解度,這樣,通過控制溫度使蛋白質(zhì)變性沉淀,通過離心將RNA及蛋白質(zhì)和脫核酵母菌體分離,從而達(dá)到提取之目的,。其中食鹽起到自溶促進(jìn)劑,,以及防腐與脫臭的作用,。買點無酶的吸頭、離心管,,找一個普通的試驗臺,,穿好實驗服戴好手套,保護(hù)好自己就好,。
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢:1,、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個實驗操作步驟簡化快捷從時間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時甚至更長的時間),。2,、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率,。(能完全通過化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)。3,、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專一吸附特性和強(qiáng)吸附力,。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實驗成功,,尤其是對熒光定量PCR實驗等,。RNA提取試劑注意事項:TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入,。北京正規(guī)RNA提取試劑價格
即用型RNA,,可在絕大多數(shù)下游應(yīng)用。蘇州RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備,??捎孟铝醒b置之一:1)玻璃勻漿器。泡酸清潔,,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次,。2)研缽。適用于液氮凍存組織的研磨,,清洗方法同玻璃勻漿器,。3)高速機(jī)械勻漿器(Polytron,Tekmar或類似產(chǎn)品),,打開開關(guān),,在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管,。RNA沉淀溶解之后,,應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,,但光推薦在緊急情況下這樣做,。3.普通雙蒸水,高壓消毒20分鐘,。用于沖洗器皿,,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液。DEPC處理的雙蒸水,。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,,室溫過夜,高壓消毒30分鐘,。用于溶解RNA,,配制TE緩沖液和75%乙醇。4.濕冰,。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解,。5.其它用品。電泳槽,,雙蒸水沖洗,。離心機(jī)和加樣器,無需處理,。6.戴手套,。注意某些實驗如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,為防污染,,須較全仔細(xì)清洗實驗器具和實驗區(qū)域,。蘇州RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
蘇州君欣生物科技有限公司是一家集研發(fā)、制造,、銷售為一體的****,公司位于江蘇省張家港市塘橋鎮(zhèn)東城科技創(chuàng)業(yè)園C幢二樓,,成立于2019-12-16,。公司秉承著技術(shù)研發(fā)、客戶優(yōu)先的原則,,為國內(nèi)原代細(xì)胞,,無血清細(xì)胞凍存液,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,,動物疾病模型的產(chǎn)品發(fā)展添磚加瓦,。在孜孜不倦的奮斗下,公司產(chǎn)品業(yè)務(wù)越來越廣,。目前主要經(jīng)營有原代細(xì)胞,,無血清細(xì)胞凍存液,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,,動物疾病模型等產(chǎn)品,,并多次以精細(xì)化學(xué)品行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),、客戶需求定制多款多元化的產(chǎn)品。蘇州君欣生物為用戶提供真誠,、貼心的售前,、售后服務(wù),產(chǎn)品價格實惠,。公司秉承為社會做貢獻(xiàn),、為用戶做服務(wù)的經(jīng)營理念,致力向社會和用戶提供滿意的產(chǎn)品和服務(wù),。蘇州君欣生物科技有限公司嚴(yán)格規(guī)范原代細(xì)胞,,無血清細(xì)胞凍存液,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,,動物疾病模型產(chǎn)品管理流程,,確保公司產(chǎn)品質(zhì)量的可控可靠。公司擁有銷售/售后服務(wù)團(tuán)隊,,分工明細(xì),,服務(wù)貼心,為廣大用戶提供滿意的服務(wù),。