糖原染色生物技術(shù)優(yōu)勢:(1)擁有針對不同組織的特殊固定液,;(2)擁有日本進口的各種染料,,保證切片染色效果,;(3)擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊伍,,保證實驗快速,、有效的完成。實驗樣本要求:(1)植物材料在選擇時須盡可能不損傷植物體或所需要的部分,;(2)動物材料取用時需對動物施以麻醉,,常用的麻醉劑有氯仿和,或?qū)游餁⑺篮笱杆偃〕鏊枰慕M織,;(3)取材必須新鮮,,這一點對于從事細胞生物學研究尤為重要,應該盡可能割取生活著的組織塊,,并隨即投入固定液,,固定液與組織塊的體積比應在10:1;(4)切取材料時刀要銳利,,避免因擠壓細胞使其受到損傷,;(5)切取的材料應小而薄,便于固定液迅速滲入內(nèi)部,。一般厚度不超過3mm,,大小不超過5×5m㎡。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別,。北京如何使用糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原,、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,,不主張應用唾液,。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置,。山東咨詢糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別等決定。
糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時過濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,,放冰箱中保存。若溶液變紅,,即不能再用,。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,,一般可用3個月,,變黃則失效
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶,。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,,屬水解酶類,,相當穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,,其反應產(chǎn)物可用多種方法檢測出來,。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個基因被普遍應用于基因調(diào)控的研究中,。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,,可以選擇三種檢測方法:組織化學法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高),。其中較為常用的是組織化學法,。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞,、骨骼肌,、心肌等處。
PAS染色的臨床意義:1.紅細胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時幼紅細胞可呈陽性反應,,有時陽性反應幼紅細胞的百分比增高,,陽性反應的程度也很強。有時紅細胞也呈陽性反應,。②缺鐵性貧血,、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比也較高,。有時紅細胞也可呈陽性反應,。③巨幼細胞性貧血、溶血性貧血,、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,,幼紅細胞為陰性反應,有時*個別幼紅細胞呈陽性反應糖原的固定要及時,,而且標本要新鮮。浙江口碑好的糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
生物膜與細胞器的研究,。北京如何使用糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水,。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應重新配制使用),。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗,。(4)Schiff氏液15-30分鐘,。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘,。(7)脫水,、透明,、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,,細胞核呈藍色,。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑,。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,,待冷卻至50℃過濾,,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,,此時溶液應為無色,。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,,染色效果較差,。北京如何使用糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
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