外泌體（exosomes）是活細胞經過"內吞-融合-外排"等一系列調控過程而形成的膜性囊泡，來源于晚期核內體(也稱為多囊泡體),，直徑約為30-150nm,，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液,、唾液,、尿液及母乳等體液中，同時外泌體也存在于組織和細胞間隙中,。人體中幾乎所有類型的細胞均能產生外泌體,，人體中大約有1014個外泌體，大約平均每個細胞產生1000-10000個,。外泌體中含有核酸（DNA,、miRNA、lncRNA,、mRNA,、tRF等）、蛋白和脂類,，在細胞間物質和信息轉導中發(fā)揮重要作用,，研究表明其在干細胞、免疫調控,、瘤轉移,、血管生成以及生物標志物等領域都發(fā)揮著不可替代的作用。外泌體在免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移,、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用。南昌外泌體提取試劑服務電話

2015年,，隨著精細醫(yī)學概念的提出,，越來越多的人開始關注如何能做到疾病的精確診斷和治病。外泌體作為一個新型的研究熱點,，由于它在體內存在的普遍性和獲取的便捷性,，已經成為了疾病診斷治病的潛在有效方式,，在精細醫(yī)學發(fā)展上有著光明的前景。多泡內體的腔內囊泡,，要么分選進溶酶體將物質降解,，要么作為外泌體分泌到胞外環(huán)境中。將膜分選到不同的腔內囊泡群中的機制尚不清楚,。該研究發(fā)現物質被分選到內體膜上的不同子域中,，并且外泌體相關結構域向內體腔的轉移不取決于ESCRT（運輸所需的內體分選復合體）的功能，但是需要鞘脂神經酰胺,。純化的外體富含神經酰胺,，并且在神經鞘磷脂酶被壓制后外泌體釋放減少。這些結果確定了內體內膜運輸和外泌體形成的途徑,。開封外泌體提取試劑直銷廠家外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢：純化和富集的完整血漿/血清,，尿液和細胞培養(yǎng)基中外泌體可用于功能研究。

外泌體的提取方法：1,、磁珠免疫法,。外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白）,，用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高,、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗,，難以普遍普及,。2、多聚物沉淀法,。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物,，可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集病毒,，現在也被用來沉淀外泌體,，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合物,，機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等,。

外泌體相關miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個核苷酸的非編碼小RNA,，能夠通過下調或壓制靶mRNAs來調節(jié)轉錄水平上的基因表達，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現存在于NSCLC患者外泌體中,，參與一些病癥的形成和演化過程,。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結合，從而阻滯整個生物通路,。因此,，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優(yōu)勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達,，與75例健康者相比,，發(fā)現了兩種高表達的miRNA（miR-25和miR-223）。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達進行了評估,，結果顯示,，12個一些病癥相關的miRNA*在肺病患者中過度表達。Cazzoli等收集了30個血漿樣本,，發(fā)現4種外泌體miRNA（miR-378a,、-379a、-139-5p,、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高,，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908。外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實驗,，難以普遍普及。

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,，而傳統超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高、操作難度大,。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,，組分經過優(yōu)化處理，適用于細胞培養(yǎng)上清液,、血清,、血漿、尿液及其他體液（腦脊液,、腹水,、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取,，并搭配純化過濾裝置,，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時，可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理,。2.當血清,、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,，可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進行Westernblot檢測,，可以鑒定所提的外泌體,。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。外泌體的提取,、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法,。南京正規(guī)外泌體提取試劑推薦廠家

近幾年來，市場上已出現各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,。南昌外泌體提取試劑服務電話

1983年,，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發(fā)現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中,。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中，包括血液,、唾液,、尿液、腦脊液和乳汁中,。有關他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長,，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規(guī)化應用的關鍵。南昌外泌體提取試劑服務電話

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