鼠尾膠原：鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗,、彎頭吸管、平皿,、三角燒瓶,、燒杯、量筒,、天平,、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原（兩個(gè)同學(xué)一組操作）,。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。制備鼠尾膠原：1,、取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘,；2、手持尾巴,，用止血鉗夾住鼠尾的,，折斷尾骨后拉出尾腱；3,、將尾腱剪斷置于平皿中,，生理鹽水浸泡；4,、重復(fù)步驟2,、3，直至尾腱量夠用,；5,、吸去生理鹽水，將尾腱稱(chēng)重（0.5-1克）,；6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,；7,、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液,；8,、搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置一星期,；9、離心,，4000轉(zhuǎn)/分,，10-15分鐘；10,、吸取上清,，分裝成小瓶，4℃保存,。制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。寧波正規(guī)鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：通過(guò)醋酸抽提、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞,。也可用于制備三維膠,，模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng),。1,，在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng),。1mg/ml濃度以上，pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠,，檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長(zhǎng),、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長(zhǎng),。使用方法：1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度：1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,。合肥鼠尾膠原直銷(xiāo)廠家鼠尾膠原醋酸溶解：按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。

鼠尾膠原包被培養(yǎng)板：胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來(lái)源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法,。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團(tuán)塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基,。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2,、PECAM1,、vWF,、CD34,、VE-cadherin、GATA-2,。②分化細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin,、CD31。③分化細(xì)胞具有吞噬低密度脂蛋白功能,。說(shuō)明將人胚胎干細(xì)胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過(guò)EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導(dǎo),可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細(xì)胞,。為研究胞外基質(zhì)對(duì)誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的作用以及相關(guān)信號(hào)分子機(jī)制打下了基礎(chǔ)。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉,。

鼠尾膠原蛋白的用途是什么：在工業(yè)應(yīng)用方面,，鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層,。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥,。它還可以用來(lái)制造一種凝膠,，可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基,。此外,，還可以把它當(dāng)膠水使用,。在化妝品行業(yè)，鼠尾膠原蛋白可當(dāng)作沐浴液和肥皂中的凝膠,。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護(hù)膚霜,。不過(guò),，用于撫紋,，或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?；蜇i提取。不過(guò),，用于撫紋,，或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從牛或豬提取,。將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,。

鼠尾膠原簡(jiǎn)介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無(wú)菌下制備，純度達(dá)到95%以上,，可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠,，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng),。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：1,、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2、無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性,。3,、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,，貼壁及生長(zhǎng)正常,。4,、本品濃度1mg/mL，pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,，NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長(zhǎng)正常,、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長(zhǎng)正常,。一種基于鼠尾膠原蛋白：各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,，余量的水。貴陽(yáng)正規(guī)鼠尾膠原銷(xiāo)售廠家

制備鼠尾膠原：重復(fù)步驟2、3,，直至尾腱量夠用。寧波正規(guī)鼠尾膠原

I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法,，經(jīng)過(guò)乙酸抽提、離心,、滅菌,、透析等步驟制備得到的高純度,、高活性膠原蛋白,，屬于醫(yī)藥級(jí)別產(chǎn)品,，可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿（單分子層包被），適合多種類(lèi)型細(xì)胞的貼壁如肝臟細(xì)胞,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,、胚胎細(xì)胞、肌細(xì)胞,、肺細(xì)胞,、神經(jīng)鞘細(xì)胞等。I型膠原蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板,，規(guī)格為6/24孔板,，表面經(jīng)I型膠原蛋白包被，可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附,。使用這種細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞,，可以獲得良好的細(xì)胞貼壁率，細(xì)胞增殖速度快,，形態(tài)均一,，細(xì)胞培養(yǎng)成功率高。寧波正規(guī)鼠尾膠原

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