外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),，現(xiàn)今,，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。1983年,，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊,，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),，無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。近年來(lái),，隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深,。北京外泌體提取試劑供應(yīng)商

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）。超離法是較常用的外泌體純化手段,，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心,。在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法,。通過(guò)密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時(shí),，對(duì)離心時(shí)間極為敏感外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)無(wú)法實(shí)現(xiàn)臨床的常規(guī)化應(yīng)用。

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）,。超離法是較常用的外泌體純化手段,，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑,；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量,。2.密度梯度離心,。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,，是一種區(qū)帶分離法,。通過(guò)密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高,，但步驟繁瑣，耗時(shí),，對(duì)離心時(shí)間極為敏感,。

外泌體（Exosome）是細(xì)胞主動(dòng)分泌的囊泡樣小體，大小均一,，直徑30-200nm,，密度1.10-1.18g/ml，來(lái)源普遍,，幾乎所有細(xì)胞都可分泌,，在血液，尿液,，唾液,，腦脊液，腹水,，乳汁等體液中普遍分布,。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中,。1996年，研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細(xì)胞依賴的抗一些病癥反應(yīng),，開(kāi)啟了外泌體蛋白研究的新天地,。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)解答了細(xì)胞如何組織其內(nèi)部較重要的運(yùn)輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘。來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。

2015年,，隨著精細(xì)醫(yī)學(xué)概念的提出,，越來(lái)越多的人開(kāi)始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和治病。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,，已經(jīng)成為了疾病診斷治病的潛在有效方式，在精細(xì)醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景,。多泡內(nèi)體的腔內(nèi)囊泡,，要么分選進(jìn)溶酶體將物質(zhì)降解，要么作為外泌體分泌到胞外環(huán)境中,。將膜分選到不同的腔內(nèi)囊泡群中的機(jī)制尚不清楚,。該研究發(fā)現(xiàn)物質(zhì)被分選到內(nèi)體膜上的不同子域中，并且外泌體相關(guān)結(jié)構(gòu)域向內(nèi)體腔的轉(zhuǎn)移不取決于ESCRT（運(yùn)輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合體）的功能,，但是需要鞘脂神經(jīng)酰胺,。純化的外體富含神經(jīng)酰胺，并且在神經(jīng)鞘磷脂酶被壓制后外泌體釋放減少,。這些結(jié)果確定了內(nèi)體內(nèi)膜運(yùn)輸和外泌體形成的途徑,。外泌體的提取方法：磁珠免疫法。上海外泌體提取試劑廠家

同時(shí)對(duì)超速離心機(jī)的設(shè)備要求以及操作程序的培訓(xùn)較大提高了提取成本,。北京外泌體提取試劑供應(yīng)商

目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為,，外泌體的產(chǎn)生過(guò)程為：細(xì)胞膜內(nèi)陷，形成內(nèi)體（endosome）,，再形成多泡體（multivesicularbodies,，MVB），較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì),、脂類、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見(jiàn)于1981年,，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，并命名為exosome,。對(duì)于外泌體的作用,，當(dāng)時(shí)推測(cè)為細(xì)胞排泄廢物的一種方式,。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle），所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng),。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過(guò)外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì),。隨著有關(guān)外泌體研究越來(lái)越多，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原呈遞,、細(xì)胞分化、一些病癥生長(zhǎng)于侵襲等各種生物過(guò)程中,。目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離,。北京外泌體提取試劑供應(yīng)商

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