外泌體的提取方法：1,、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白）,，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高,、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普及,。2,、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物,，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,。用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：避免劇烈搖晃,。珠海外泌體提取試劑報(bào)價(jià)

外泌體在肺病治病中的作用：有研究發(fā)現(xiàn)，使用外泌體運(yùn)載紫杉醇（PTX）可顯著提高病細(xì)胞對(duì)PTX的吸收,，將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細(xì)胞毒性,，Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。Aqil等在進(jìn)行裸鼠實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),，加載至外泌體中的雷公藤紅素（Exo-CEL）比普通的CEL有更強(qiáng)的抗一些病癥功效,，且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性，由此可以證明,，外泌體制劑可以有效增強(qiáng)CEL功效并降低與劑量有關(guān)的毒性,。到目前為止，外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制,，有效的外泌體藥物遞送平臺(tái)的搭建以及外泌體相關(guān)的潛在治病靶點(diǎn)的探索,。已有的研究表明外泌體在肺病治病領(lǐng)域有著廣闊的前景，期待外泌體在肺病治病領(lǐng)域早日得到突破,，造福更多的患者,。開封正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商超濾離心法簡(jiǎn)單高效,，且不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不高的問題,。

外泌體(exosomes,，Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡,，因其可以將供體細(xì)胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞,，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換，并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1),。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，使其可以穿透許多生物膜,，提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性,，可以穩(wěn)定存在于血液中，納米級(jí)尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR),。目前,，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體,。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,，使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制。

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范,、統(tǒng)一定量及鑒定等,。關(guān)于外泌體的提取有超速離心、試劑盒,、超濾法,、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊,。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣,，費(fèi)事費(fèi)力,，而且步驟多導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中容易污染，且損耗量大,，使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定。而且對(duì)于抽提細(xì)胞上清來(lái)說,，更是極為不請(qǐng)便,，試想用提取300ml的上清需要6個(gè)50ml離心管,，無(wú)論是過濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀，都具有操作極其不便的缺點(diǎn),，總之非常麻煩,。而超濾法存在外泌體會(huì)堵塞膜孔，造成濃縮效率低,，濃縮管重復(fù)利用差,，甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會(huì)粘連成團(tuán)，造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差,，對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)也有影響,?？梢允褂肗anoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度。

研究中研究人員發(fā)現(xiàn),，胃病細(xì)胞周圍富含TAM,。TAM以M2極化表型為特征，并促進(jìn)胃病細(xì)胞在體外和體內(nèi)的遷移,。此外,，研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導(dǎo)的遷移活動(dòng)。通過使用質(zhì)譜方法,，研究人員確定載脂蛋白E（ApoE）是M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質(zhì),。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來(lái)源于M2外泌體的蛋白質(zhì)，是決定胃病細(xì)胞遷移潛力的主要驅(qū)動(dòng)因素,。然而,，來(lái)自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細(xì)胞的外泌體在體外和體內(nèi)對(duì)胃病細(xì)胞的遷移沒有顯著影響。在機(jī)制上,，M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體介導(dǎo)ApoE啟動(dòng)的PI3K-Akt信號(hào)通路,，并在TAM和受體胃病細(xì)胞之間進(jìn)行細(xì)胞間轉(zhuǎn)移，促進(jìn)細(xì)胞骨架的遷移,。總的來(lái)說,，該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導(dǎo)的功能性ApoE蛋白從TAM轉(zhuǎn)移到一些病癥細(xì)胞,，促進(jìn)了胃病細(xì)胞的遷移。機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑,。上海外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

多聚物沉淀法早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,。珠海外泌體提取試劑報(bào)價(jià)

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來(lái)眾多文獻(xiàn)報(bào)道,，肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展,，是早期診斷肺病的有效途徑,。有研究發(fā)現(xiàn),，NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽(yáng)性的占80%，而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽(yáng)性的只占2%,，因而認(rèn)為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標(biāo)志物。Park等通過Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),，進(jìn)一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號(hào)傳導(dǎo)途徑以促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展,，因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學(xué)標(biāo)記物。近幾年來(lái),，市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,。珠海外泌體提取試劑報(bào)價(jià)

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