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外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：肺病細(xì)胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進(jìn)一些病癥的生長,。據(jù)相關(guān)報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,，促進(jìn)一些病癥血管的生成,；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進(jìn)肺病的生血管作用。此外,，有研究發(fā)現(xiàn),，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加,，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力,。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍合肥正規(guī)外泌體提取試劑單價在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法,。

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：在一些病癥微環(huán)境中,，一些病癥細(xì)胞來源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng),；肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,，可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動TLR8，使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號通路活化,，從而導(dǎo)致一些病癥的生長和轉(zhuǎn)移,。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中，細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色,。據(jù)有關(guān)報道稱,，NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,，啟動的T細(xì)胞可以通過調(diào)控Fas信號通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）的表達(dá),，進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn),。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,，但也有報道稱,，外泌體miR-302b可以通過壓制TGFβRⅡ來壓制肺病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與增殖。如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,。

外泌體（exosome）是所有細(xì)胞釋放出的細(xì)菌大小的顆粒,。它們天然地存在于血液中。根據(jù)來自美國德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項新的研究,，對外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法,。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員RaghuKalluri博士。在這項新的研究中,，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解，增加它們的總存活率,。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運(yùn)送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因,，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活。他們證實(shí)外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用,，這是因為這些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞（包括病細(xì)胞）中,。目前人們多采用超速離心、免疫磁珠,、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離。

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）,。超離法是較常用的外泌體純化手段,，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,，但過程比較費(fèi)時,，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑,；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量,。2.密度梯度離心,。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法,。通過密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,，但步驟繁瑣,，耗時，對離心時間極為敏感使用可截留100KD分子量的膜,，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后,。天津正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨

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外泌體的提取,、分離方法：開發(fā)高效,、快速、穩(wěn)定,，并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法,，是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多,，但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān),。通常分離步驟少、產(chǎn)率高,，但是純度會受到影響,。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)，實(shí)驗可以根據(jù)樣本來源,、下游實(shí)驗?zāi)康牡?，選擇合適的外泌體分離方法。2015年,，國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出,，簡單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實(shí)驗的需求。因此,，推薦聯(lián)合使用各種方法,，從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。廣州外泌體提取試劑服務(wù)電話

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