外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63,、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來,。磁珠法具有特異性高、操作簡便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實驗,，難以普遍普及。聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集菌類，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑,。如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物,。機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑,。天津外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體與免疫系統(tǒng)：不同的細(xì)胞來源的外泌體，包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞)、病細(xì)胞,、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞,，釋放出帶有載體的外泌體，可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性,。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響,，刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾?。和饷隗w可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān),；體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用,。上海正規(guī)外泌體提取試劑直銷價是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷,。

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,，可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,，其中包含RNA、蛋白質(zhì),、microRNA,、DN**段等多種物質(zhì),，存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,，雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”，所以才被排出來,，但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞,。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用,。專利申請利用分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來進(jìn)行體外培養(yǎng),。

所有的細(xì)胞都能分泌外泌體，但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,，調(diào)控細(xì)胞生理活動。同時,，外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化,、促進(jìn)一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送,。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫有哪些,？lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA，包括circRNA,、lncRNA和mRNA,。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA,、miRNA,、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人,、大鼠,、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結(jié)果,，涉及蛋白,、mRNA、miRNA,、脂類等信息,。外泌體提取：基于聚合物的沉淀技術(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,。

外泌體的提取,、分離方法：聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史,，近幾年，將其作為一種新的方法來分離外泌體,。目前,，市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒，較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,，該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,，但是價格昂貴,。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜，之后再低速離心,。將人尿液來源細(xì)胞的培養(yǎng)基通過0.22微米濾膜過濾,，以去除大的細(xì)胞殘片以及其它雜質(zhì)。深圳正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨

外泌體的提取方法,，先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng),。天津外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法,。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原,、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法,，主要用于生物大分子的分離,、純化,。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識別,，這使得提取的外泌體純度高,，但是產(chǎn)量低。Zarovni等分別用超速離心,、密度梯度離心和免疫層析法,，從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白，結(jié)果表明,，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix,、CD9、CD63),，同時,，ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。天津外泌體提取試劑直銷廠家

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