粘液染色法:粘液一般有以下幾點(diǎn)特性:(1)對(duì)鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中,、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色,。(2)對(duì)某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性,。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外,。(4)溶于弱堿溶液,。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,,結(jié)果,;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,,核呈藍(lán)色,。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點(diǎn)是能同時(shí)顯示出酸性和中性粘液物質(zhì),。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水,。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘,。(3)蒸餾水洗,。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,,水洗,。(6)常規(guī)脫水、封片,。細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,。北京如何使用糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)
PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng),,有時(shí)陽(yáng)性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽(yáng)性反應(yīng)的程度也很強(qiáng),。有時(shí)紅細(xì)胞也呈陽(yáng)性反應(yīng),。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng),,有時(shí)陽(yáng)性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高,。有時(shí)紅細(xì)胞也可呈陽(yáng)性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血,、溶血性貧血,、再生障礙性貧血和白血病等疾病時(shí),幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),,有時(shí)個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)北京如何使用糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)一般厚度不超過3mm,,大小不超過5×5m㎡。
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:染色結(jié)果對(duì)比鮮明,、結(jié)果易保存,、陽(yáng)性突出的染色方法,;突出的陽(yáng)性結(jié)果在于所選擇方法表達(dá)的色調(diào)及如何進(jìn)行背景的復(fù)染。結(jié)果能夠長(zhǎng)時(shí)間保存,、不褪色對(duì)于后續(xù)的調(diào)閱,、科研、論文均較為有利,。如顯示淀粉樣物質(zhì),,甲基紫染色法雖然流程較為簡(jiǎn)單,但結(jié)果不易保存,,陽(yáng)性對(duì)比度相對(duì)不突出,;剛果紅染色法陽(yáng)性結(jié)果明顯,長(zhǎng)時(shí)間保存不褪色,,流程簡(jiǎn)便,,更是實(shí)用的方法。如顯示彈性纖維,,地衣紅染色染液雖配制較方便,,但結(jié)果對(duì)比度相對(duì)欠佳,與其他幾個(gè)染色法相比,,多不選擇使用,。
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基,。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中,。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,,晾干,。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,,晾干,。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,,晾干,。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,,晾干鏡檢,。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷,。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別,。
染色的一般原則:因檢測(cè)細(xì)胞的類型,、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同,,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,,因此建議每次檢測(cè)均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽(yáng)對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié),。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC,,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價(jià)格便宜,。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號(hào)較強(qiáng),;檢測(cè)某些弱表達(dá)的抗原,,推薦使用此熒光素。價(jià)格較FITC昂貴,。APC激發(fā)光633nm,,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上,,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本,。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別等決定,。北京如何使用糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)
對(duì)臨床樣本進(jìn)行染色,以便樣本的進(jìn)一步篩查和檢測(cè),。北京如何使用糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)
糖原染色:細(xì)胞內(nèi)含1,,2-乙二醇基的多糖類經(jīng)過碘酸氧化后產(chǎn)生醛基,與特殊染液作用,,使無(wú)色品紅變成紅色化合物,沉淀于胞質(zhì)之中,。紅色的深淺與細(xì)胞中起反應(yīng)的1,,2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細(xì)胞與李—斯細(xì)胞的鑒別,,前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性,,后者為陰性或弱陽(yáng)性;用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別,,前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性,,而后者反應(yīng)為陰性或弱性。正常值正常情況下,,紅細(xì)胞系統(tǒng)的原,、幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞,;粒細(xì)胞系統(tǒng)的原粒細(xì)胞、原單核細(xì)胞和大多數(shù)淋巴細(xì)胞為陰性反應(yīng),。自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽(yáng)性反應(yīng),。北京如何使用糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)