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外泌體可通過流式,、WB(檢測指標有CD9,CD63,CD81)、電鏡觀察,、NTA粒徑追蹤等手段檢測,,普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker,、精細醫(yī)療,、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小,,樣本含量低,,提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心,、超濾離心法,、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等,。但到目前為止,,仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性,。外泌體是細胞間進行物質運輸和信息交流的重要工具,,可以通過調節(jié)免疫功能促進一些病癥的增殖,血管新生和一些病癥轉移,。與細菌傳染,,幫助細菌逃避免疫關系很大,并與心血管疾病,,老年癡呆等疾病具有密切關系外泌體的提取,、分離方法:聚合物沉淀法。成都外泌體提取試劑直銷價
外泌體(Exosome)是細胞主動分泌的囊泡樣小體,,大小均一,,直徑30-200nm,密度1.10-1.18g/ml,,來源普遍,,幾乎所有細胞都可分泌,,在血液,尿液,,唾液,,腦脊液,腹水,,乳汁等體液中普遍分布,。外泌體較早在1986年發(fā)現于培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中。1996年,,研究者發(fā)現外泌體作為抗原呈遞因子參與T細胞依賴的抗一些病癥反應,,開啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學獎解答了細胞如何組織其內部較重要的運輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘,。成都外泌體提取試劑直銷價外泌體(Exosome)是從體液(尿液,、血液、唾液,、腹水,、胸腹水等)和細胞液中快速提取的。
外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:純化和富集的完整血漿/血清,,尿液和細胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,;樣本輸入量多樣;無需耗時的超速離心,,過濾或特殊注射器,;無需沉淀試劑,也無需過夜培養(yǎng),;無需蛋白酶處理,;適用于多種物種,;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結合蛋白,;可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,以評估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體(exosomes)是一種能被機體內大多數細胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質雙層膜的微小膜泡,。它普遍存在并分布于各種體液中,攜帶和傳遞重要的信號分子,,形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統(tǒng),,影響細胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進程密切相關。
外泌體鑒定:外泌體分離之后,,需要經過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物,多角度進行鑒定,。l透射電鏡鑒定法:簡稱TEM,,適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察,,即通常為茶托型或一側凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法:簡稱NTA,,該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測速度快,檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。lWesternblot分子標志物檢測:外泌體標志蛋白包括四跨膜蛋白家族,,如CD9、CD63和CD81,;細胞質蛋白,,如肌動蛋白(Actin)和鈣磷脂結合蛋白(Annexins);使用可截留100KD分子量的膜,,通過離心截留上清中的外泌體,,截留完成后此提取方法條件復雜,成本高,。
外泌體研究的主要應用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈,、細胞遷移,、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面,。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲,。一些病癥,。一些病癥轉移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML)細胞的增殖,、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標,。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化,、病細胞增殖和轉移過程,。免疫。β細胞將含有蛋白質和miRNA的外泌體釋放到細胞外,,并可轉移到其他代謝部位或免疫內皮細胞,,有利于維持葡萄糖體內平衡或造成胰島素抵抗。心血管,。外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉移到內皮細胞導致了內皮細胞的損傷促進動脈硬化,。分子標記,。疾病診斷。在酒精性肝病,、NASH,、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞病中發(fā)現循環(huán)EVs的水平上升嚴重阻礙了我國在外泌體的研究和臨床應用上的發(fā)展,。開封正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷
用于外泌體提取的體液收集注意事項:注意抗凝劑的選擇,。成都外泌體提取試劑直銷價
外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高,、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,,組分經過優(yōu)化處理,,適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清,、血漿,、尿液及其他體液(腦脊液、腹水,、羊水,、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項:1.對于待測樣品粘度過大時,可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理,。2.當血清,、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,,可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白(CD63,CD9,CD81等)進行Westernblot檢測,,可以鑒定所提的外泌體,。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量成都外泌體提取試劑直銷價