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鄭州無血清細胞凍存液廠家推薦

來源: 發(fā)布時間:2023-11-21

無血清細胞凍存液,通用于人和各種動物細胞株,。特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力,。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒,、霉菌和支原體等的污染,,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存,,也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存,。產(chǎn)品特色:不含動物源成分,病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低,,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。成分明確,,無批次差異,。可直接存放于-80℃冰箱凍存,,無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時,、省力、省錢)。獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率,。即用型,,無需現(xiàn)配,即開即用,。通用型,,適用于凍存各種細胞系,原代細胞,??晌⒘浚粌龃?,例如雜交瘤細胞的凍存,,省時高效。存儲條件:儲存于4℃以下,質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,,為期兩年,。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能-20℃冷凍保存,。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,,推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存,。無血清凍存液特性:適合無血清培養(yǎng)細胞與含血清培養(yǎng)細胞,。鄭州無血清細胞凍存液廠家推薦

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細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。細胞凍存的原理:細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,,實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力,。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷,。杭州昆明無血清細胞凍存液無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色:可微量,原位凍存,,例如雜交瘤細胞的凍存,,省時高效。

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凍存細胞注意事項:凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則,。我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,,以便獲得較佳結(jié)果。在細胞處于生長期密度達到70-90%的情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存,,并且細胞傳代盡可能靠前,。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意較佳凍存條件取決于所用細胞系,。細胞應緩慢冷凍,,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,使溫度每分鐘大約降低1°C,。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基,。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO或者甘油等冷凍保護劑。

細胞凍存注意事項:1,、細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。2,、復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,,分裝過多,細胞濃度過低,,不利于細胞的貼壁,。3、加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,,從如果你加培養(yǎng)基的太少,,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,,從以前的資料來看,,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%,。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓。

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凍存細胞注意事項:冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,,并可減緩冷卻速度,,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡),。注:DMSO可促進有機分子進入組織,。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質(zhì)安全危害相適應的設備和操作規(guī)范,,并應按照當?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑,。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細胞凍存液,,使用方便,復蘇率高,。注意冷凍保護劑DMSO的品質(zhì):DMSO應為試劑級等級,,無菌且無色,以5-10ml小體積分裝,,4℃避光保存,,勿作多次解凍無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色:獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率。廈門成都無血清細胞凍存液

在冰袋附近操作時,,低溫避免保護劑對細胞造成損傷,。鄭州無血清細胞凍存液廠家推薦

細胞凍存的操作步驟:1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液,;2.取對數(shù)生長期的細胞,,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗,。3.去除PBS,,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;4.離心1000rpm,,5min,;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml,;6.將細胞分裝入凍存管中,,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標明細胞的名稱,,凍存時間及操作者,;8.凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,,可增至-5℃~-10℃/min,;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中,。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,,移入液氮容器內(nèi),。鄭州無血清細胞凍存液廠家推薦