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來源: 發(fā)布時間:2023-12-05

外泌體的提取的方式:1、免疫磁珠法,,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,,特異性高、操作簡單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備,,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實驗,。2,、PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,,純度較高,。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。六是色譜法,,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,,應(yīng)用不普遍,。專利申請利用分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來進(jìn)行體外培養(yǎng)。杭州正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷

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外泌體與肺病預(yù)后:在當(dāng)代精細(xì)醫(yī)療的大趨勢下,,外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向,。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù)。根據(jù)一些病癥來源的外泌體在肺病的發(fā)生的發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用及相關(guān)機制的研究,,臨床醫(yī)療人員可以針對不同的患者制定較合適的治病方案,,以達(dá)到改善肺病患者生存率,延長肺病患者生存時間的目的。但是,,針對外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,,如:外泌體的純化及標(biāo)記方法、如何尋找外泌體的靶基因,、外泌體的作用機制及信號通路等,。總而言之,,外泌體的研究有著廣闊的前景,,基于外泌體與肺病的研究,有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和治病的有效措施,,造福更多的患者,。重慶正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家多聚物沉淀法早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,。

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所有的細(xì)胞都能分泌外泌體,,但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,,調(diào)控細(xì)胞生理活動。同時,,外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化,、促進(jìn)一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送,。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫有哪些,?lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,包括circRNA,、lncRNA和mRNA,。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA,、miRNA,、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人,、大鼠,、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結(jié)果,,涉及蛋白,、mRNA,、miRNA、脂類等信息,。

外泌體的形成與鑒定:首先,,細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個杯狀結(jié)構(gòu),包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白,,導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome,,ESE)的從頭形成,或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合,;trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs,。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes,LSEs),,較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體)。MVBs是通過endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的,,這一過程導(dǎo)致MVBs含有多個ILVs,。MVB可以與溶酶體或自噬體融合,較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白、RNA,、DNA,、氨基酸和代謝物。使用可截留100KD分子量的膜,,通過離心截留上清中的外泌體,,截留完成后外泌體的提取分離:試劑盒提取。

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研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性,。與脂質(zhì)體和其他合成藥物納米顆粒載體不同,,外泌體含有可能增強內(nèi)吞作用的跨膜和膜錨定蛋白,從而促進(jìn)其內(nèi)容物的遞送,。CD47是外泌體蛋白質(zhì)之一,,是一個普遍表達(dá)的整合素相關(guān)跨膜蛋白,其部分功能可以保護細(xì)胞免受吞噬作用,。CD47是信號調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα,,也稱為CD172a)的配體,CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,,從而壓制吞噬作用,。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖,,增強胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細(xì)胞有一定毒性作用,,但使用外泌體能夠較小化對細(xì)胞的毒性,。研究人員發(fā)現(xiàn),CD47和病基因KRAS驅(qū)動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,,并增強胰腺病細(xì)胞對外泌體的特異性,。所以,外泌體的這種特性增強了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期,。用于外泌體提取的體液收集注意事項:抽血時間。無錫正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷

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外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答,、抗原提呈,、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面,。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,,促進(jìn)了一些病癥的生長與侵襲,。一些病癥,。一些病癥轉(zhuǎn)移,。來自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血病(AML)細(xì)胞的增殖,、遷移和壓制細(xì)胞凋亡,。治病靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,,從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞,,以明顯降低RAS活化、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過程,。免疫,。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗,。心血管。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動脈硬化,。分子標(biāo)記,。疾病診斷,。在酒精性肝病、NASH,、菌類性肝炎,、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升杭州正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷