研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成,并初步闡明其分子機(jī)制,。研究加深了對(duì)瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認(rèn)識(shí),,為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎(chǔ)。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對(duì)象,,從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體,,并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部,并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進(jìn)行對(duì)照,。研究發(fā)現(xiàn),,瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),,瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5p)壓制血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF受體(VEGFR2)的表達(dá)從而阻斷血管生成的信號(hào)通路,。這些發(fā)現(xiàn)加深了人們對(duì)瘧原蟲抗病機(jī)理的理解,并為瘧原蟲療法治病一些疾病的臨床研究提供進(jìn)一步的理論依據(jù),。外泌體的提取方法:磁珠免疫法,。太原正規(guī)外泌體提取試劑單價(jià)
外泌體相關(guān)技術(shù)在過去幾年一直在快速發(fā)展,預(yù)計(jì)市場(chǎng)將大幅增長(zhǎng),,因?yàn)樗鼈兛杀粦?yīng)用到液體活檢,、精細(xì)醫(yī)學(xué)和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。特別是,,一些疾病衍生的外泌體通過調(diào)節(jié)血管生成,、轉(zhuǎn)移和免疫來影響細(xì)胞的侵襲性,使其成為用于一些疾病檢測(cè),、診斷和治病選擇的極其有用的生物標(biāo)志物來源,。在風(fēng)險(xiǎn)投資方面,有很多市場(chǎng)活動(dòng),。2016年1月,,ExosomeDiagnostics公司在B輪融資中獲得6000萬美元資金,并于2017年7月獲得3000萬美元的C輪融資,。同樣,,CodiakBiosciences公司于2016年由MDAnderson一些疾病中心與兩家風(fēng)險(xiǎn)投資公司共同成立,以8000多萬美元的A和B輪融資成立該公司,。2017年11月29日,,CodiakBioSciences公司又增加了7650萬美元的C輪融資。在整個(gè)A,、B和C輪融資中,,CodiakBioSciences公司募集了驚人的1.685億美元。廣州外泌體提取試劑推薦廠家外泌體提取:免疫分離外泌體的原理大多是通過抗體包被的微球,,特異性結(jié)合外泌體,。
外泌體的提取的方式:1、免疫磁珠法,,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,,特異性高、操作簡(jiǎn)單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備,,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn),。2,、PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,,純度較高,。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。六是色譜法,,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,,應(yīng)用不普遍,。
外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法,。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63,、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,,即可將外泌體吸附并分離出來,。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,,不利于下游實(shí)驗(yàn),,難以普遍普及,。2、多聚物沉淀法,。聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,,其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,,雜蛋白較多(假陽(yáng)性),,顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,,機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等。外泌體提?。嚎捎糜谑占笥?00nm,、400nm或200nm的外泌體。
外泌體的提取方法:1,、色譜法,。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對(duì)關(guān)系而對(duì)溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔,,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,,首先被流動(dòng)相洗脫出來;小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,,在柱中受到更強(qiáng)地滯留,,更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,,但是需要特殊的設(shè)備,,應(yīng)用不普遍。2,、超濾離心,。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì),,利用不同截留相對(duì)分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離,,便可獲得外泌體。超濾離心法簡(jiǎn)單高效,,且不影響外泌體的生物活性,,是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì),。長(zhǎng)沙外泌體提取試劑報(bào)價(jià)
外泌體提?。翰钏匐x心,。差速離心仍然是較常見的外泌體分離技術(shù)之一。太原正規(guī)外泌體提取試劑單價(jià)
外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA,,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá),,目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程,。單個(gè)miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個(gè)mRNA結(jié)合,,從而阻滯整個(gè)生物通路。因此,,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢(shì),。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報(bào)道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),與75例健康者相比,,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA(miR-25和miR-223),。Rabinonowits等對(duì)27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個(gè)miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評(píng)估,結(jié)果顯示,,12個(gè)一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá),。Cazzoli等收集了30個(gè)血漿樣本,發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA(miR-378a,、-379a,、-139-5p、-200b-5p)在肺病患者血清中明顯升高,,用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積(AUC)為0.908,。離心除去細(xì)胞器,留取上清,。太原正規(guī)外泌體提取試劑單價(jià)